[发明专利]一种样本核酸检测和中和的方法在审
| 申请号： | 202210570731.4 | 申请日： | 2017-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN114921524A | 公开（公告）日： | 2022-08-19 |
| 发明（设计）人： | 张太松;陈斐斐;张盼;王善辰 | 申请（专利权）人： | 利多（香港）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/686;C12Q1/70;C12R1/93 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 徐关寿 |
| 地址： | 中国香港中西区上环德辅*** | 国省代码： | 香港;81 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 样本 核酸 检测 中和 方法 | ||
1.一种样本核酸检测方法，其特征在于，所述方法包括：(1)利用核酸提取液提取样本中的核酸，获得样本核酸溶液；(2)将(1)中获得的样本核酸溶液与PCR反应液混合在一起得到混合液，利用所述混合液进行扩增反应，检测样本中的核酸；所述PCR反应液比所述核酸提取液中的pH值低。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸提取液的pH值为10.5～12.5，所述PCR反应液的pH值为8.0～9.0。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸提取液包括碱金属氢氧化物10mM～100mM，Tris-HCl 1mM～25mM，Chelex-100 2％～5％(w/v)，EDTA 0.1％～0.4％(w/v)；所述PCR反应液包括Tris-HCl、Tris-Acetate或Tris-Borate中的一种，其浓度为5mM～75mM；优选地，所述碱金属氢氧化物为NaOH或KOH。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述混合液的pH值为8.0～9.0。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)之前，利用浓缩液对样本进行浓缩；优选地，所述浓缩液包括NaCl 2.5％～4.5％(w/w)，PEG6000 10％～13％(w/v)。
6.如权利要求1-5之一所述的方法，其特征在于，所述样本中的核酸包括HBV、人B27基因、HPV 6/11、TB或HCMV核酸。
7.一种中和样本核酸的方法，其特征在于，所述方法包括(1)利用在pH值为10.5～12.5核酸提取液提取样本中的核酸，获得样本核酸溶液；(2)将(1)中获得的样本核酸溶液加入PCR反应液中进行中和；所述PCR反应液比所述核酸提取液中的pH值低。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述核酸提取液包括碱金属氢氧化物10mM～100mM，Tris-HCl 1mM～25mM，Chelex-100 2％～5％(w/v)，EDTA 0.1％～0.4％(w/v)；所述PCR反应液包括Tris-HCl、Tris-Acetate或Tris-Borate中的一种，其浓度为5mM～75mM。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述PCR反应液的pH值为8.0～9.0。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述核酸提取液选自0.05M～0.6M的碱金属氢氧化物溶液，优选地，所述碱金属氢氧化物溶液选自NaOH溶液或KOH溶液。
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