[发明专利]一种小而密低密度脂蛋白胆固醇的测定试剂及测试方法

权利要求书

1.一种小而密低密度脂蛋白胆固醇的非疾病诊断或治疗目的的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）、将样品与第一试剂混合反应，得反应液1；

（2）、读取步骤(1)所得的反应液1在546nm和700nm波长处的吸光度值；

（3）、将步骤(1)所得的反应液1与第二试剂混合反应，得反应液2；

（4）、读取步骤(3)所得的反应液2在546nm和700nm波长处的吸光度值；

（5）、计算步骤(4)与步骤(2)所得吸光度的差值；

（6）、通过与标准品吸光度值的比较，求得样品中sdLDL的含量；

其中，第一试剂中添加了离液离子化合物、表面活性剂A和胆固醇酯酶，所述离液离子化合物通过电荷作用对脂蛋白进行分散，以使表面活性剂A和胆固醇酯酶选择性地作用于特定脂蛋白，从而达到测量特定脂蛋白中胆固醇的量；

所述离液离子化合物的浓度为10mmol/L～300mmol/L；所述离液离子化合物为溴化钠；

所述第一试剂还包括添加胆固醇测量的酶，包括胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化氢酶；所述胆固醇酯酶的含量为1～10KU/L，所述胆固醇氧化酶的含量为1～10KU/L，所述过氧化氢酶的含量为100～300KU/L；

所述第一试剂包括添加聚乙二醇，含量为0.1～1.0%，以分散乳糜微粒及极低密度脂蛋白，协同离液离子化合物和脂蛋白酯酶以及表面活性剂A之间的结合作用；

所述表面活性剂A为生育酚聚乙二醇琥珀酸酯，含量为0.05～3.0%；

所述第一试剂还包括添加Trinder’s色原化合物和二价金属离子；所述第一试剂中Trinder’s色原化合物的含量为0.2～10mmol/L；所述二价金属离子为镁离子，含量为1～90mmol/L；

所述第一试剂还包括添加缓冲液、防腐液、稳定剂中的一种或多种；所述缓冲液为MOPSO缓冲液，所述缓冲液的含量为25～120mmol/L；所述稳定剂为牛血清白蛋白、氯化钠和EDTA，所述防腐剂为Proclin-300，含量为0.01～0.5%；

所述缓冲液、所述稳定剂和所述防腐剂在调节pH之前添加；

其中，第二试剂中添加了过氧化物酶、4-氨基安替比林、叠氮钠和表面活性剂B；所述过氧化物酶的含量为0.2～10KU/L，所述4-氨基安替比林的含量为1.0～10mmol/L，所述叠氮钠的含量为0.01～0.3%，所述表面活性剂B为陶氏公司的Tergitol TMN-6；

所述第二试剂还包括缓冲剂和/或稳定剂；所述缓冲液较佳地为MOPS缓冲液或MOPSO缓冲液，所述缓冲液的含量为30～75mmol/L；所述稳定剂较佳地为牛血清白蛋白；含量为0.2～5g/L。