[发明专利]一种烷基酚半抗原的合成方法

说明书

本发明属于精细化工合成技术领域，公开了一种烷基酚半抗原的合成方法，包括以下步骤：一、化合物A的合成：将壬基酚、四氯乙烯加热，当溶液温度上升到40℃时，开始滴加乙酰氯的四氯乙烯溶液，反应完毕后，将过量的乙酰氯蒸出，缓慢向溶液中加入定量NaHCO3溶液直至溶液pH=7，中和完毕后，搅拌、静置和分层，将油层水洗至中性，减压蒸馏，收集0.01MPa下220℃时的馏分，得到化合物A。本方案用化学合成的方法设计合成出具有免疫原性的壬基酚人工半抗原分子从而诱导产生特异性强、免疫性高、灵敏度高的抗体，为烷基酚的半抗原的合成方法提供更多选择，得到的壬基酚类似物，可作为酶联免疫分析方法中的前体，具有很高的使用价值。

技术领域

本发明涉及精细化工合成技术领域，更具体地说，涉及一种烷基酚半抗原的合成方法。

背景技术

烷基酚类化合物(Alkyl Phenol，APs)，属于内分泌干扰物质中重要的一种，具有明显的环境雌激素效应。该类化合物多为脂溶性有机化合物，化学稳定性较强，一旦摄入不易降解排出，有生物累积性，危害性较大，即使微量也容易对生物造成影响。同时其在环境表面中分布也十分广泛，并且含量较低。烷基酚类化合物在表面活性剂、工业用洗涤剂、绝缘材料、造纸助剂等领域具有广泛用途。烷基酚类化合物中最重要的两个物质分别为壬基酚(Nonyl Phenol，NP)和辛基酚(Octyphenl,OP)。两者都属于联合国UNEP制定的持久性有毒化学污染物。APs类化合物可以对生物体形成外因性雌性激素作用，是促乳房癌细胞活性化与增殖现象环境内分泌干扰物，同时对细胞的DNA有明显的损伤作用。

现如今烷基酚主要的分析法有：高效液相色谱法、气相色谱法、LC-MS、LC-MS/MS等。现有的仪器检测虽然有灵敏度高、适用范围广等优点，但是样品前处理复杂，所需的仪器昂贵，成本高，检测时间长。利用特殊的抗原抗体的特异性结合，再通过标记技术实现定量和定性的分析，这种分析方法称为免疫学检测方法。免疫学检测方法具有的多种优点，许多研究者也曾尝试建立的免疫学检测方法。研究特异性强，灵敏度高同时价格低廉，能快速简便的免疫检测技术是十分有必要的。

关于烷基酚免疫检测的文献国外仅有数篇报道。Irina V.Mikhura等报道了利用化学合成的方法构建壬基酚类似物，合成路线如说明书附图2所示，在殷祥刚提出的“一种适用于烷基酚类药物人工抗原的合成方法”中套用了以上的合成路线。作者通过壬基酚类似物为半抗原，用活性酯法将其与载体蛋白牛血清蛋白(BSA)偶联，用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定偶联物的偶联比。在该方法中合成半抗原是一个重点。作者以w-甲氧基羰基烷羧酸酰氯作为原料通过合成单甲基二羧酸的酯，再通过酰化、还原最后制得壬基酚类似物作为半抗原。

但是经过实验发现，该合成方案存在问题：首先反应时间较长，在反应过程中容易受到环境等因素的影响。苯环上连接了一个醚键以及烃基链上也连接了一个醚键。在第一次加入碱性溶液使烃基链上的醚键变为羟基时，苯环上的醚键会对反应造成干扰，使其反应不彻底，导致产率降低。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种烷基酚半抗原的合成方法。

为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。

一种烷基酚半抗原的合成方法，包括以下步骤：

一、化合物A的合成：

将壬基酚、四氯乙烯加热，当溶液温度上升到40℃时，开始滴加乙酰氯的四氯乙烯溶液，反应完毕后，将过量的乙酰氯蒸出，缓慢向溶液中加入定量NaHCO3溶液直至溶液pH＝7，中和完毕后，搅拌、静置和分层，将油层水洗至中性，减压蒸馏，收集0.01MPa下220℃时的馏分，得到化合物A；

二、化合物B的合成：

将化合物A用乙醚萃取，然后再用锌粉和醋酸汞在甲苯中回流反应6小时，得到化合物B；

三、化合物C的合成：