[发明专利]一种制备短串联重复序列分型参照物的方法

权利要求书

1.一种STR分型参照物的制备方法，包括以下步骤：

S1：针对目的STR基因座的核苷酸序列设计一对引物，包括正向引物F1和反向引物R1；

S2：将所述F1的3’端的x个碱基的和所述R1的3’端的y个碱基分别进行核苷酸变化，分别得到F2和R2；

所述x和y分别独立选自2～6；

S3：在所述F2的3’端和所述R2的3’端分别附加m和n个碱基，分别得到F3和R3；

所述F3的3’端所附加的碱基为：所述F1对应的DNA序列下游的m个碱基；

所述R3的3’端所附加的碱基为：所述R1对应的DNA序列下游的n个碱基；

S4：利用所述F3和所述R3对含所述目的STR基因座的DNA进行PCR扩增，得到第一PCR扩增产物；

S5：将所述第一PCR扩增产物进一步连接到质粒上，得到重组质粒；

S6：利用所述F2和所述R2对所述重组质粒进行扩增，得到第二PCR扩增产物，即为STR分型参照物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述核苷酸变化包括核苷酸交换或核苷酸互换。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述m选自7～15。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述n选自7～15。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述目的STR基因座为人类STR基因座。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述人类STR基因座包括常染色体STR基因座、Y染色体STR基因座和X染色体基因座。

7.一种STR分型标准物质，其特征在于，所述STR分型标准物质包括权利要求1～6任一项所述的制备方法制备得到STR分型参照物。

8.含权利要求1～6任一项所述的制备方法制备得到的所述STR分型参照物的重组质粒在制备STR分型标准物质中的应用。

9.一种STR分型产品，其特征在于，所述STR分型产品包括目的STR基因座的引物和根据所述目的STR基因座的引物使用权利要求1-6任一项所述的制备方法制备得到的STR分型参照物。

10.权利要求7所述的STR分型标准物质或权利要求9所述的STR分型产品在亲缘鉴定、案件排查、个体识别以及尸源认定中的应用。