[发明专利]TP53INP2在增强急性髓系白血病细胞对TRAIL敏感性方面的应用

说明书

本发明属于生物医学研究技术领域，具体涉及TP53INP2在增强急性髓系白血病细胞对TRAIL敏感性方面的应用。本发明的目的在于提供一种增强TRAIL治疗急性髓系白血病疗效的策略及方法。本发明首次检测了AML细胞中TP53INP2的表达水平，发现TP53INP2高表达的白血病细胞对TRAIL治疗的敏感性增加，表明TP53INP2的表达水平可以作为临床上应用TRAIL治疗AML患者的潜在判断指标。此外，本发明建立了一种能够增强TRAIL治疗AML患者疗效的策略和方法。TRAIL相对不敏感的白血病病人，可通过增加其TP53INP2的表达水平，以提高TRAIL的疗效，从而促进TRAIL治疗在AML患者的临床应用。

技术领域

本发明属于生物医学研究技术领域，具体涉及TP53INP2在增强急性髓系白血病细胞对TRAIL敏感性方面的应用。

背景技术

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是一类造血干细胞克隆增殖性的恶性血液疾病，以髓系白血病细胞异常增生及正常造血细胞受抑制为主要表现，呈高度异质性，是成人最常见的急性白血病类型。目前AML的临床治疗药物主要以阿糖胞苷(cytrarabine，Ara-c)和柔红霉素(Daunorubicin，DNR)为主，通过干扰DNA合成继而诱发白血病细胞发生凋亡。尽管常规化疗药物在临床治疗上取得了不错的疗效，但是仍有部分患者治疗效果不佳，面临着敏感性差，副作用大和耐药的问题。因此，需要寻找一种新的治疗策略来解决目前临床面临的问题。

细胞凋亡包括内源性凋亡和外源性凋亡两种方式，常规化疗药物Ara-c和DNR诱导的凋亡类型属于内源性凋亡。事实上，通过死亡配体，如Fas，肿瘤坏死因子，肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)，与细胞表面的死亡受体结合进而诱发的外源性凋亡在凋亡过程中也发挥了重要的作用。其中TRAIL诱导的细胞凋亡，因其具有较高的肿瘤特异性和对正常细胞较低的毒性而备受关注。TRAIL在实体肿瘤中相关的研究非常之多，近年来在AML中也逐渐有了应用，但是疗效却相对有限。最近的研究报道，肿瘤蛋白p53诱导的核蛋白2(tumor protein53-induced nuclear protein 2，TP53INP2)在部分肝癌细胞中高表达，重要的是，相比其他肝癌细胞，高表达TP53INP2的肝癌细胞对TRAIL诱导的凋亡敏感性显著增加。此外，在乳腺癌细胞中，也观察到高表达TP53INP2的三阴性乳腺癌细胞在TRAIL处理后呈现更高的凋亡水平。上述研究报道提示TP53INP2在TRAIL诱导实体肿瘤细胞凋亡中扮演着重要的角色。然而，TP53INP2在白血病发生中的作用以及是否增强白血病细胞对TRAIL的敏感性还未见报道。

发明内容

1.为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种增强TRAIL治疗急性髓系白血病疗效的策略及方法。

2.本发明的实施例提供一种实验性验证TP53INP2在增强AML细胞对TRAIL敏感性方面的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)检测TP53INP2在各个白血病细胞系的表达水平。首先，利用癌症基因百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedi，CCLE)数据库分析在各类白血病细胞系中TP53INP2的基因表达水平；然后，利用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR，qRT-PCR)实验和蛋白质印迹法(western blotting)检测各类白血病细胞系中TP53INP2的基因和蛋白表达水平。

(2)接下来检测TP53INP2的表达水平与白血病细胞对TRAIL的敏感性是否相关。由于在AML中TP53INP2的表达水平与白血病细胞对TRAIL的敏感性是否相关仍然是未知的，故在本实施例中按照如下方式检测。首先利用活细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8，CCK-8)检测TRAIL诱导后各白血病细胞系体外增殖能力的改变情况。最后，利用WesternBlotting和流式细胞术(Flow cytometry，FCM)检测TRAIL诱导后各白血病细胞系的凋亡状况。