[发明专利]TP53INP2在增强急性髓系白血病细胞对TRAIL敏感性方面的应用

权利要求书

1.提供一种增强TRAIL治疗急性髓系白血病的疗效的系统及方法，按以下步骤实现：

(1)检测TP53INP2在各个白血病细胞系的表达水平。首先，利用癌症基因百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedi，CCLE)数据库分析在各类白血病细胞系中TP53INP2的基因表达水平；然后，利用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR，qRT-PCR)实验和蛋白质印迹法(western blotting)检测各类白血病细胞系中TP53INP2的基因和蛋白表达水平。

(2)接下来检测TP53INP2的表达水平与白血病细胞对TRAIL的敏感性是否相关。由于在AML中TP53INP2的表达水平与白血病细胞对TRAIL的敏感性是否相关仍然是未知的，故在本实施例中按照如下方式检测。首先利用活细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8，CCK-8)检测TRAIL诱导后各白血病细胞系体外增殖能力的改变情况。最后，利用Western Blotting和流式细胞术(Flow cytometry，FCM)检测TRAIL诱导后各白血病细胞系的凋亡状况。

(3)通过上述实施例，可以表明在AML中TP53INP2的表达水平与白血病细胞对TRAIL的敏感性是否相关。在此，首先构建了pCDNA3.1-EGFP/HA-TP53INP2质粒；其次，将构建的pCDNA3.1-EGFP/HA-TP53INP2质粒转染于低表达TP53INP2的白血病细胞中，使这类TRAIL不敏感的白血病细胞获得TRAIL敏感性。pCDNA3.1-EGFP/HA-TP53INP2质粒的表达通过qRT-PCR和Western Blotting来验证。

(4)为了验证构建的pCDNA3.1-EGFP/HA-TP53INP2质粒是否能够增强白血病细胞对TRAIL的敏感性，在本实施例中，首先通过CCK-8检测试剂盒检测了过表达HA-TP53INP2质粒后是否增强TRAIL抑制白血病细胞体外增殖的能力；其次通过Western Blotting和FCM检测过表达HA-TP53INP2质粒后是否增强了TRAIL诱导白血病细胞凋亡的能力。

2.按照权利要求1所述的提供一种增强TRAIL治疗急性髓系白血病的疗效的系统及方法，其特征在于，步骤(1)所述的利用公共数据库CCLE分析在11种白血病细胞中TP53INP2的基因表达水平的方法如下：TP53INP2在11种白血病细胞中的基因表达数据均来自于癌症基因百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedi，CCLE，https://depmap.org/portal/)数据库。另外，将TP53INP2的基因表达数据从CCLE下载完成后，利用GraphPad Prism(Version7.00)软件实现可视化。