[发明专利]一种发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法

权利要求书

1.一种发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将发酵液离心，得到第一次上清液；

(2)在所述第一次上清液中加入乙腈，离心得到第二次上清液；

(3)将第二次上清液通过高效液相三重四极杆串联质谱测定γ-氨基丁酸。

2.如权利要求1所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，离心时间为5-10min，离心转速为8000-10000rpm。

3.如权利要求1所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述乙腈和上清液体积比例为1～3：1。

4.如权利要求1所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述离心温度为4℃，离心时间为10～20min，离心转速为10000～15000rpm。

5.如权利要求1～3任一所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，所述高效液相三重四极杆串联质谱测定的条件为：

ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(3.0×100mm，1.8μm)，进样量1μL，流动相A相：0.01％甲酸+2mM甲酸铵水溶液，B相：0.01％甲酸+2mM甲酸铵甲醇溶液；

采用以下梯度：

95％A：0.0-1.0min，95-10％A：1.0-4.0min，10％A：4.0-6.0min，10-95％A：6.0-6.1min，95％A：6.1-8.0min。总运行时间为8min，流速为0.40mL/min。

6.如权利要求5所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，所述发酵液由短乳杆菌接种于培养基中发酵得到，所述短乳杆菌分类命名为Lactobacillus brevis，菌株号为YSJ-3，已于2021年8月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23307。

7.如权利要求6所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，所述培养基为MRSG肉汤培养基，所述发酵条件为：培养温度37℃，培养时间为48h。

8.如权利要求6所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，所述培养基由胡萝卜汁以及加入所述胡萝卜汁中的配料混合而成，所述配料包括L-谷氨酸钠、牛肉粉以及葡萄糖；所述发酵条件为：培养温度37℃，培养时间为48h。

9.如权利要求9所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，所述L-谷氨酸钠、牛肉粉和葡萄糖在所述胡萝卜汁中的质量百分比分别为0.3～0.7％、0.3～0.7％和3.0～7.0％。

10.如权利要求9所述的发酵液中γ-氨基丁酸的测定方法，其特征在于，所述L-谷氨酸钠、牛肉粉和葡萄糖在所述胡萝卜汁中的质量百分比分别为0.5％、0.5％和5％。