[发明专利]一种合成熊果酸的重组酵母及其构建方法有效
| 申请号： | 202210432868.3 | 申请日： | 2022-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN114561312B | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 王颖;贾男;余源;李敬知;姜尧竹;李春 | 申请（专利权）人： | 北京理工大学;清华大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/53;C12N15/52;C12N15/54;C12P33/00;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人： | 张丹;徐丹丹 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 合成 果酸 重组 酵母 及其 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种合成熊果酸的方法，其特征在于，所述的方法包括发酵培养重组酵母，所述的重组酵母表达CYP450酶、CPR酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和NADH依赖性的羟甲基戊二酸还原酶，
所述的CYP450酶来源于枇杷，编码CYP450酶的序列如SEQ ID NO：27所示；
所述的CPR酶来源于百脉根，
所述的甘油醛-3-磷酸脱氢酶来源于乳酸克鲁维酵母，
所述的NADH依赖性的羟甲基戊二酸还原酶来源于硅酸杆菌，
所述的重组酵母为合成α-香树脂醇的酿酒酵母，
所述的发酵培养包括在pH为6.2的含半乳糖的培养基中分批补料发酵，所述的分批补料时间为144h。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的重组酵母通过导入CYP450酶的编码基因、CPR酶的编码基因、甘油醛-3-磷酸脱氢酶的编码基因和NADH依赖性的羟甲基戊二酸还原酶的编码基因构建。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的导入的各个基因为单拷贝或多拷贝。
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