[发明专利]ANGPTL8作为分子标志物在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用

说明书

本发明提供了ANGPTL8作为分子标志物在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用；本发明还提供ANGPTL8分子标志物的检测试剂盒在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用，以及ANGPTL8分子标志物的检测引物、定量PCR试剂盒。本申请经过大量研究发现，ANGPTL8基因编码的蛋白在肝纤维化患者和肝纤维化小鼠模型的肝脏和血清中表达显著升高；在高脂喂养诱导肝纤维化和CCL4诱导肝纤维化小鼠模型中，ANGPTL8基因敲除小鼠肝纤维化水平显著低于野生对照小鼠。表明分泌性蛋白ANGPTL8可作为分子标志物用于诊断早期肝纤维化的产品的制备。

技术领域

本发明涉及生物医学检测技术领域，特别涉及ANGPTL8作为分子标志物在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用。

背景技术

近年来，随着城市化进程的加快、生活方式的转变以及高脂高能量食物的摄入，肝纤维化在人群中的发病呈现明显增加的趋势。肝纤维化是肝脏慢性炎症或组织损伤后引发的修复反应，是多数肝硬化、肝癌等严重肝脏疾病的前期阶段，约10％的肝纤维化患者会转化为肝癌。研究表明，肝纤维化经积极治疗可以延缓甚至是可逆的。但是由于肝纤维化没有明显的症状，目前临床上缺乏早期、灵敏且高效的无创诊断手段，导致肝纤维化患者难以早期诊断并接受治疗。肝组织活检固然是肝纤维化诊断的“金标准”，但由于其是有创检查，且可能出现出血、死亡等严重并发症，实施起来难度大；常规彩超、CT等对肝纤维化早期诊断意义不大；尽管临床上有许多无创性检测方法如瞬时弹性成像、磁共振弹性成像、血清标记物(肝纤四项)等对肝纤维化具有较高的诊断价值，但因诊断的灵敏度和特异度不够理想仍待进一步完善。

因此，需要开发新型肝纤维化的早期诊断的血清学指标。

发明内容

本发明目的是提供ANGPTL8作为分子标志物在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用。

在本发明的第一方面，提供了ANGPTL8作为分子标志物在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用。

进一步地，所述用于诊断早期肝纤维化的产品包括ANGPTL8分子标志物的检测试剂和/或检测引物和/或检测试剂盒。

在本发明的第一方面，提供了ANGPTL8分子标志物的检测试剂盒在制备用于诊断早期肝纤维化的产品中的应用。

所述诊断早期肝纤维化的产品可包括ANGPTL8的ELISA检测试剂盒、也可以包括ANGPTL8的定量PCR试剂盒。

作为一种具体的实施方式，ANGPTL8的ELISA检测试剂盒包括：ANGPTL8抗体，以及双抗体夹心ELISA法所需的检测试剂。

进一步地，所述试剂盒包括：

(A)包被有ANGPTL8抗体的ELISA酶标板，所述的包被抗体为兔抗人ANGPTL8的多克隆抗体；

(B)检测ANGPTL8抗原的抗体，为小鼠抗人ANGPTL8的单克隆抗体；

(C)酶标二抗，为HRP标记的山羊抗小鼠IgG；

(D)标准蛋白；

(E)样品稀释液、包被缓冲液、封闭液、ELISA酶标板洗涤液、抗体稀释液、显色液和终止液。

进一步地，所述的ELISA检测试剂盒中，

所述包被缓冲液，为1×PBS，pH:7.4；

所述封闭液，为含3％牛血清白蛋白+PBS溶液的封闭液；

所述ELISA酶标板洗涤液，为含0.05％Tween-20的1×PBS溶液；

所述抗体稀释液，为1×PBS；

所述显色液，为3,3′,5,5′-四甲基联苯胺；