[发明专利]检测粪便中幽门螺杆菌的引物和探针及其试剂盒在审
申请号: | 202210281976.5 | 申请日: | 2022-03-22 |
公开(公告)号: | CN114540520A | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | 刘国栋;聂艳妮 | 申请(专利权)人: | 北京中瑞恒达科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 北京世衡知识产权代理事务所(普通合伙) 11686 | 代理人: | 肖淑芳 |
地址: | 102200 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 粪便 幽门 螺杆 引物 探针 及其 试剂盒 | ||
1.一种用于从粪便中检测幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)的实时荧光PCR的特异性引物。
2.根据权利要求1所述的引物,其核苷酸序列为:
HP alpB-FP:5’-AACCCATGGCTTGGGAATTT-3’,
HP alpB-RP:5’-CCAAAGAATTGCTTATAACCGATTTTA-3’。
3.与权利要求1或2所述引物配合使用的荧光探针。
4.根据权利要求3所述的荧光探针,其核苷酸序列为:
(FAM)5’-CAGCTCTCAAGTGAATGCGTTTAACGGG-3’(BHQ1)。
5.一种粪便中幽门螺杆菌检测的方法,其特征在于,以样品总DNA为模板,以权利要求1或2所述的引物和权利要求3或4所述的探针进行实时荧光定量PCR,根据扩增曲线判定结果。
6.如权利要求5所述的幽门螺杆菌的检测方法,其特征在于,实时荧光定量PCR的反应体系为
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述实时荧光定量PCR的反应程序为:37℃去污染2min,37℃去污染2min,95℃预变性10min,1个循环;95℃变性10s,60℃退火30s,45个循环。
8.含有权利要求1或2所述引物和/或权利要求3或4所述探针的试剂盒。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其还包括:荧光定量反应液、阴性模板和阳性模板,所述阴性模板为去核酸水,所述阳性模板为0.364fg/μl~3.64ng/μl的幽门螺杆菌基因组DNA。
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