[发明专利]一种从发酵液中分离提取L-苹果酸钙的方法及应用

权利要求书

1.一种从发酵液中分离提取L-苹果酸钙的方法，其特征在于：步骤如下：

（1）酸化：含L-苹果酸钙发酵液中，缓慢加入质量分数为36%的浓盐酸酸化，低速搅拌，将pH调至为0.5-2.0，得到酸化发酵液；

（2）絮凝：在步骤（1）得到的发酵液中加入以发酵液质量计1.0-2.0%的聚合氯化铝，絮凝剂聚合氯化铝预先配制成质量浓度8-10%的水溶液，缓慢倒入发酵液中，60-100 rpm 搅拌10-30 min，然后搅拌速度调至400-700 rpm，10-60 min；加入与絮凝剂等质量的硅藻土，搅拌均匀；

（3）板框过滤：将步骤（2）得到的混合液通过板框压滤机进行固液分离，滤布孔径为300-500目，初滤液进行二次过滤，待滤饼形成，滤液澄清时，收集滤液；

（4）超滤：将步骤（3）分离的滤液经过平均分子量1000-3000的超滤膜，除去其中的大分子杂质；

（5）加入质量终浓度为3-6 %的活性炭常温脱色5-8 h，过滤得脱色液；

（6）脱色液碱沉

收集脱色液，缓慢加入氢氧化钠，低速搅拌，调节pH值至6.0-7.0，使得体系中的L-苹果酸、氯化钙和氢氧化钠反应生成L-苹果酸钙沉淀和氯化钠，L-苹果酸钙沉淀析出；

（7）固液分离

采用过滤或离心的方式，将步骤（6）得到的L-苹果酸钙悬浊液脱水，固相保留并用自来水清洗，洗水量为板框容积量的2-4倍，即得L-苹果酸钙。

2.根据权利要求1所述的从发酵液中分离提取L-苹果酸钙的方法，其特征在于：所述步骤（1）中含L-苹果酸钙发酵液按照如下方法制备得到：

采用黑曲霉工程菌株S1149进行苹果酸发酵，收集黑曲霉菌株孢子，按照2×10⁶/mL的接种量接种于苹果酸发酵培养基中，恒温摇床中发酵5天，发酵条件为温度28 ℃，转速200rpm，获得含80 g/L的L-苹果酸钙发酵液；

其中，所述苹果酸发酵培养基为：葡萄糖100 g/L，酵母粉5 g/L，七水硫酸镁0.1 g/L，碳酸钙80 g/L。

3.根据权利要求1所述的从发酵液中分离提取L-苹果酸钙的方法，其特征在于：所述步骤（1）和（6）中低速搅拌的转速均为100-300 r/min。

4.根据权利要求1至3任一项所述的从发酵液中分离提取L-苹果酸钙的方法，其特征在于：所述步骤（7）中L-苹果酸钙悬浊液脱水时的液相留用，并经过如下处理：

浓缩结晶：将所得液相加入真空旋转蒸发器中，在10 Kpa-20 Kpa、60 ℃条件下减压蒸发浓缩，使得氯化钠溶液达到过饱和，大于380 g/L，进一步冷却得到氯化钠固体；

溶解脱色、结晶干燥：将氯化钠固体用去离子水溶解后，通过脱色、重结晶、烘干得到氯化钠。

5.如权利要求1至4任一项所述的方法在L-苹果酸钙分离提取方面中的应用。