[发明专利]一种黄樟素半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种黄樟素半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，本发明制备得到了两种半抗原，半抗原H‑SG和半抗原H‑2C，应用半抗原H‑SG偶联载体蛋白BSA得到人工抗原H‑SG‑BSA，并进一步制备得到用于检测黄樟素的特异性抗体，以人工抗原H‑2C‑OVA作为包被原；该抗体对黄樟素最低检测限为0.088ng/mL，半抑制浓度为2.79ng/mL，定量检测范围为0.31～24.74ng/mL具有良好的灵敏度和特异性，对黄樟素类似物均无交叉反应，可特异性检测黄樟素；本发明提供了更优的黄樟素的免疫检测原料，为黄樟素的快速准确检测提供了更优选择。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，具体涉及一种黄樟素半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

背景技术

黄樟素(safrole)又称黄樟油素、黄樟脑，无色或微黄色液体，不溶于水，易溶于氯仿，乙醚和其他非极性有机溶剂，有樟木气味，天然存在于肉桂、肉豆蔻、黑胡椒和紫苏等植物中，是许多食用天然精油如黄樟精油、八角精油和樟脑油的主要成分。由于其舒适的气味，黄樟油曾经在食品、洗涤用品和化妆品中作为调味剂和调香剂。许多常见的香料，包括黑胡椒、可可、肉豆蔻、肉桂、龙蒿、八角、茴香、香菜、西芹、月桂、小茴香、香果和丁香都含有微量的黄樟素。黄樟素用来合成胡椒基丁醚和胡椒醛，胡椒基丁醚是农药的增效剂，胡椒醛用来调味，是香料的组分。黄樟素也是非法生产毒品的一个重要组成部分。黄樟素容易诱发基因突变和损坏肝脏，甚至导致肝癌，食物中黄樟素的含量在 0.5％以上时可引起肝细胞瘤，有致癌作用，黄樟素是消化系统、血液系统、泌尿系统的强致癌物，世界各国均禁止使用其为食品添加剂。

目前黄樟素的检测主要集中在化妆品、香精香料、茶叶、药物等样品中。分析方法主要有气相色谱法(GC)、气象色谱-质谱联用法(GC-MS)、高效液相色谱法等。现有技术虽然也公开了用于黄樟素检测的半抗原、抗原、抗体等，但是存在着黄樟素半抗原合成步骤多、反应副产物多、抗体检测限相对较高等问题。

免疫分析方法的关键在于设计出合适的半抗原，从而制备出灵敏度高、特异性强的抗体，因此，有必要研究出全新的黄樟素半抗原，简化了半抗原的合成步骤，降低抗体的检测限，提高黄樟素抗体的特异性和灵敏度。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中黄樟素免疫检测半抗原、抗体存在的缺陷和不足，提供一种黄樟素半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

本发明的目的在于提供黄樟素半抗原。

本发明的目的还在于提供所述黄樟素半抗原在制备黄樟素人工抗原中的应用。

本发明的目的还在于提供黄樟素人工抗原。

本发明的目的还在于提供所述黄樟素人工抗原在制备黄樟素抗体中的应用。

本发明的目的还在于提供一种黄樟素多克隆抗体。

本发明的目的还在于提供一种黄樟素的检测方法。

本发明的目的还在于提供一种检测黄樟素的试剂盒。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种黄樟素半抗原，为半抗原H-SG或半抗原H-2C，所述半抗原H-SG的结构式如式(I)所示，

所述半抗原H-SG采用系统命名法命名为：(4-((2-(苯并[d][1,3]二氧戊环-5-基)乙基)氨基)-4-氧代丁酸，即 4-((2-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)ethyl)amino)-4-oxobutanoic acid；

所述半抗原H-2C的结构式如式(II)所示，