[发明专利]一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽及其应用有效

专利信息
申请号: 202210251691.7 申请日: 2022-03-15
公开(公告)号: CN114437180B 公开(公告)日: 2023-05-19
发明(设计)人: 李晓红;王瑶;马小莉 申请(专利权)人: 青岛市市立医院
主分类号: C07K7/08 分类号: C07K7/08;C07K1/16;C12N9/16;C12P21/06;A61K38/10;A61P3/10;A23L33/18
代理公司: 福建如浩律师事务所 35223 代理人: 张欣
地址: 266000*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 蛋白 酪氨酸 磷酯酶 抑制 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽,其特征在于,其氨基酸序列为:Gln-Val-His-Gly-Ile-Ser-Pro-Pro-Asp-Ser-Thr-Lys(QVHGISPPDSTK)。

2.根据权利要求1所述的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽,其特征在于,为海藻来源。

3.一种权利要求1所述的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

将极大螺旋藻粉和水混合,搅拌溶胀2-4h,料水比为1:10~1:20,以极大螺旋藻粉加入量0.5-2%的酶底比加入木瓜蛋白酶,酶解条件为:pH值为7-8,温度45-55℃,酶解3-8h后,于80-100℃加热灭酶;

离心去除沉淀,上清液分别使用Sephadex G-15凝胶柱和Eclipse XDB-C18柱分离,组分冻干得到蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽,其氨基酸序列为:Gln-Val-His-Gly-Ile-Ser-Pro-Pro-Asp-Ser-Thr-Lys (QVHGISPPDSTK)。

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述极大螺旋藻粉和水混合的时间为2-4h。

5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,灭酶时间为10min。

6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,使用Sephadex G-15凝胶柱分离的步骤为:

以Sephadex G15对酶解物进行分离纯化,以去离子水作为流动相,流速控制在1mL/min,在280nm波长下检测洗脱液吸光度,依据洗脱曲线收集富含多肽组分浓缩并冻干。

7.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,使用Eclipse XDB-C18柱分离的步骤为:

以Zorbax SB-Aq C18柱对G-15分离得到的组分进行分离,洗脱程序为:1-5min:5%乙腈;5-55min:5%-95%乙腈;55-60min:95%乙腈;流速为0.8mL/min。

8.一种权利要求1所述的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽在制备降血糖药品中的应用。

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