[发明专利]一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽及其应用有效
申请号: | 202210251691.7 | 申请日: | 2022-03-15 |
公开(公告)号: | CN114437180B | 公开(公告)日: | 2023-05-19 |
发明(设计)人: | 李晓红;王瑶;马小莉 | 申请(专利权)人: | 青岛市市立医院 |
主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;C07K1/16;C12N9/16;C12P21/06;A61K38/10;A61P3/10;A23L33/18 |
代理公司: | 福建如浩律师事务所 35223 | 代理人: | 张欣 |
地址: | 266000*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 酪氨酸 磷酯酶 抑制 及其 应用 | ||
1.一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽,其特征在于,其氨基酸序列为:Gln-Val-His-Gly-Ile-Ser-Pro-Pro-Asp-Ser-Thr-Lys(QVHGISPPDSTK)。
2.根据权利要求1所述的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽,其特征在于,为海藻来源。
3.一种权利要求1所述的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将极大螺旋藻粉和水混合,搅拌溶胀2-4h,料水比为1:10~1:20,以极大螺旋藻粉加入量0.5-2%的酶底比加入木瓜蛋白酶,酶解条件为:pH值为7-8,温度45-55℃,酶解3-8h后,于80-100℃加热灭酶;
离心去除沉淀,上清液分别使用Sephadex G-15凝胶柱和Eclipse XDB-C18柱分离,组分冻干得到蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽,其氨基酸序列为:Gln-Val-His-Gly-Ile-Ser-Pro-Pro-Asp-Ser-Thr-Lys (QVHGISPPDSTK)。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述极大螺旋藻粉和水混合的时间为2-4h。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,灭酶时间为10min。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,使用Sephadex G-15凝胶柱分离的步骤为:
以Sephadex G15对酶解物进行分离纯化,以去离子水作为流动相,流速控制在1mL/min,在280nm波长下检测洗脱液吸光度,依据洗脱曲线收集富含多肽组分浓缩并冻干。
7.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,使用Eclipse XDB-C18柱分离的步骤为:
以Zorbax SB-Aq C18柱对G-15分离得到的组分进行分离,洗脱程序为:1-5min:5%乙腈;5-55min:5%-95%乙腈;55-60min:95%乙腈;流速为0.8mL/min。
8.一种权利要求1所述的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽在制备降血糖药品中的应用。
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