[发明专利]一种基于DNA超支化自组装检测肺癌标志物的SERS探针和试剂盒在审
申请号: | 202210232788.3 | 申请日: | 2022-04-02 |
公开(公告)号: | CN114438215A | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 张振;陈子超 | 申请(专利权)人: | 山东中医药大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6806;C12Q1/682 |
代理公司: | 北京卓胜佰达知识产权代理有限公司 16026 | 代理人: | 张串串 |
地址: | 250355 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 dna 超支 组装 检测 肺癌 标志 sers 探针 试剂盒 | ||
1.一种基于DNA超支化自组装检测肺癌标志物的SERS探针,其特征在于,所述肺癌标志物包括miRNAs-21和/或miRNA-155;
当肺癌标志物为miRNAs-21时,所述SERS探针的制备方法包括:
1)将序列F2与序列F3在85℃下反应5min,再与序列F4反应,得到产物A;
2)将序列F5与序列F6在85℃下反应5min,再与序列F7反应,得到产物B;
3)将所述步骤1)得到的产物A、步骤2)得到的产物B和序列F1反应,得到超支化树枝状结构DNA纳米分子;
所述序列F1~F7的核苷酸序列依次如SEQ ID No.1~7所示;
4)将所述步骤3)得到的超支化树枝状结构DNA纳米分子与金纳米笼在37℃下避光反应24h,得到SERS探针;
当肺癌标志物为miRNAs-155时,SERS探针的制备方法包括:
a、将序列g2与序列g3在85℃下反应5min,再与序列g4反应,得到产物I;
b、将序列g5与序列g6在85℃下反应5min,再与序列g7反应,得到产物II;
c、将所述步骤a得到的产物I、步骤b得到的产物II和序列g1反应,得到超支化树枝状结构DNA纳米分子;
所述序列g1~g7的核苷酸序列依次如SEQ ID No.8~14所示;
d、将所述步骤c得到的超支化树枝状结构DNA纳米分子与金纳米笼在37℃下避光反应24h,得到SERS探针。
2.根据权利要求1所述的SERS探针,其特征在于,所述步骤1)中序列F2和序列F3的体积比为2:3,所述序列F2和序列F3的浓度均为10-5M;
与序列F4反应的条件包括:反应温度为25℃,反应时间为4h。
3.根据权利要求1所述的SERS探针,其特征在于,所述步骤2)中序列F5和序列F6的体积比为2:3,所述序列F5和序列F6的浓度均为10-5M;
与序列F7反应的条件包括:反应温度为25℃,反应时间为4h。
4.根据权利要求1所述的SERS探针,其特征在于,所述步骤3)产物A、产物B和序列F1反应的条件包括:反应温度为25℃,反应时间为30min。
5.根据权利要求1所述的SERS探针,其特征在于,所述步骤a中序列g2和序列g3的体积比为2:3,所述序列g2和序列g3的浓度均为10-5M;
与序列g4反应的条件包括:反应温度为25℃,反应时间为4h。
6.根据权利要求1所述的SERS探针,其特征在于,所述步骤b中序列g5和序列g6的体积比为2:3,所述序列g5和序列g6的浓度均为10-5M;
与序列g7反应的条件包括:反应温度为25℃,反应时间为4h。
7.根据权利要求1所述的SERS探针,其特征在于,所述步骤c产物I、产物II和序列g1反应的条件包括:反应温度为25℃,反应时间为30min。
8.一种基于DNA超支化自组装检测肺癌标志物的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1~7任一项所述的SERS探针和磷酸盐缓冲液。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述肺癌标志物包括miRNAs-21和/或miRNA-155。
10.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01M,所述磷酸盐缓冲液的pH值为7.4。
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