[发明专利]一种脂肽及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种脂肽，包含Pam2C和多肽序列，其具有式Ⅰ所示结构式，其中，R为多肽序列，所述多肽序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:23中的任一种。本发明还提供了该脂肽的制备方法，以及作为黏膜佐剂活性成分的应用。本发明提供的新型脂肽相对于Pamsubgt;2/subgt;CSKsubgt;4/subgt;更显著的提高了粘膜部位OVA特异性sIgA和IgG的水平。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种脂肽及其制备方法，以及其在制备疫苗中的应用。

背景技术

疫苗接种是预防传染病最经济和最有效的手段，能够有效降低多种传染病的死亡率，提高生活质量。本质上，疫苗接种是模拟自然感染的过程，通过激活免疫系统产生有效的保护性免疫反应。随着生物技术的发展，多种新型技术路线的疫苗获得授权，例如重组亚单位蛋白疫苗、多糖结合疫苗和肽疫苗。然而，这些类型的疫苗由于免疫原性不理想而在应用上受到一定的限制。因此，需要添加可以佐剂等提高疫苗免疫原性且不影响疫苗成分抗原性的物质。

佐剂是添加到疫苗中以增强免疫反应的物质，其可以减少加强免疫的次数，重塑适应性免疫反应，减少抗原剂量并提高保护效果。Toll样受体(TLR)在针对微生物病原体的先天免疫反应以及随后诱导适应性免疫反应中发挥重要作用。基于TLRs在免疫反应中的重要作用，TLRs激动剂已被报道为疫苗中很有前景的佐剂，例如TLR4激动剂MPL[Wang YQ,Bazin-Lee H,Evans JT,Casella CR,Mitchell TC.MPL adjuvant contains competitiveantagonists of human TLR4.Front Immunol.2020；11:577823.]和TLR9激动剂CpG ODN[Gursel M,Gursel I.Development of CpG ODN based vaccine adjuvantformulations.Methods Mol Biol.2016；1404:289-298]，已被纳入许可的疫苗。TLR2与TLR1或TLR6形成异二聚体，相应的配体可以通过与该异二聚体结合诱导炎性细胞因子释放[Reuven EM,Fink A,Shai Y.Regulation of innate immune responses bytransmembrane interactions:lessons from the TLR family.Biochim BiophysActa.2014；1838(6):1586-93]。含有Pam2Cys和Pam3Cys的脂肽可以激活TLR2信号传导[LuBL,Williams GM,Brimble MA.TLR2 agonists and their structure-activityrelationships.Org Biomol Chem.2020；18(27):5073-509]，因此在佐剂研究中也引起研究者们的广泛关注。Pam₂CSK₄是已经发现的最有效的TLR2激动剂之一，是小鼠模型中的Th2极化佐剂[Halliday A,Turner JD,A,Bates PA,Taylor MJ.The TLR2/6ligand PAM2CSK4 is a Th2 polarizing adjuvant in Leishmania major and Brugiamalayi murine vaccine models.Parasit Vectors.2016；9:96]。