[发明专利]PCAT1的反义寡核苷酸及其在制备抑制前列腺癌核酸药物中的应用

说明书

本发明公开了PCAT1的反义寡核苷酸及其在制备抑制前列腺癌核酸药物中的应用。本发明采用生物信息学在线工具分析PCAT1序列信息，筛选长度在20碱基的、能够结合的反义寡核苷酸位点，同时利用分子生物学实验验证，证明反义寡核苷酸能够降低PCAT1在细胞内的水平。本发明为临床上治疗去势抵抗性前列腺癌，提供了新的手段。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及PCAT1的反义寡核苷酸及其在制备抑制前列腺癌核酸药物中的应用。

背景技术

前列腺癌(PCa)是男性泌尿系统中最常见的恶性肿瘤之一(Sung H,Ferlay J,Siegel RL,et al.Global cancer statistics 2020:GLOBOCAN estimates of incidenceand mortality worldwide for 36cancers in 185countries CA：a cancer journal forclinicians,2021.)。2019年美国新增和死亡病例分别超过17万例和约3万例(Siegel R,Miller K,Jemal A.Cancer statistic,2019[J].CA:a cancer journal for clinicians,2019:69；7-34.)。我国的前列腺癌发病率也呈逐年上升，前列腺癌的确切病因尚不十分清楚，但临床观察和实验研究表明，激素，遗传和环境因素均起到一定作用(Chen W,Zheng R,Baade PD,et al.Cancer statistics in China,2015[J].CA:a cancer journal forclinicians,2016:66；115-132.)。目前，前列腺癌特异性抗原(PSA)筛查逐渐普及，增加了疾病早期诊断的概率，使得部分早期患者能够及时诊治。前列腺癌的治疗包括手术和内分泌治疗为核心的多种方式。

雄激素剥夺治疗(Androgen deprivation therapy,ADT)是对这部分患者的最主要治疗方法。尽管在ADT治疗初期前列腺癌被不同程度的控制，但经过大约18个月敏感期后，大部分患者的疾病逐渐且不可逆地进展为去势抵抗性前列腺癌。去势抵抗性前列腺癌(Castration resistant prostate cancer,CRPC)是指患者经过ADT治疗后，血清睾酮水平达到去势水平(50ng/dl或1.7nmol/L)，但是疾病依然进展的前列腺癌。疾病进展的临床表现为影像学可见的肿瘤进展和/或前列腺特异性抗原(PSA)水平持续增高。后者应满足以下条件，即在PSA达2ng/mL以上，每间隔一周监测血清PSA水平，连续3次血清PSA升高，且比基础值升高50％以上。然而，由于CRPC发病机制至今不明，因而临床缺乏针对病因的精准治疗，这是当前泌尿外科学研究的难点和热点。

长链非编码RNA(lncRNA)是长度大于200个核苷酸的不能编码蛋白的RNA，位于细胞核或细胞质内。根据lncRNA在基因组上的位置，可将其分为3类：(1)位于基因间区的lncRNA，又被称为lincRNA(long intergenic RNA)；(2)天然反义链lncRNA；(3)内含子区lncRNA。由于lncRNA缺乏明显的开放阅读框，没有蛋白编码功能，因此，长期以来它被人们认为是没有生物学功能的“暗物质”。随着生物学技术的不断进步，LncRNA的生物学功能也逐渐被揭示出来。研究lncRNA与疾病之间的相关性对于实现疾病的诊断和治疗具有重要的意义。

反义核酸药物从1978年发现并提出理论，到世纪之交第一种药物上市、推出2代反义技术，再到后来发展遇到低谷，药品退市，人们对其理解与运用的过程经历了一种螺旋式的上升。其研发伊始就承担着攻克普通药物无法治愈的疾病(如肿瘤)的希冀。随着近年来几种治疗癌症的反义核酸药物获批进入临床试验，此类药物重新回到了生物制药研究的舞台，再次展现了这种药物在基因治疗领域的广阔前景。

目前，关于PCAT1在前列腺癌中的作用机制尚未有相关研究，关于靶向PCAT1反义核酸的研究还未见报道，且其化学抑制剂的研发尚不充分。

发明内容