[发明专利]一种用于检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的检测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.用于检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的组合物，其特征在于，所述组合物包括：611A上游引物、611G上游引物、611下游引物、728G上游引物、728A上游引物、728下游引物、1068C上游引物、1068A上游引物、1068下游引物、611探针、728探针和1068探针，其中：

所述611A上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.1的单链DNA；

所述611G上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.2的单链DNA；

所述611下游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.3的单链DNA；

所述728G上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.4的单链DNA；

所述728A上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.5的单链DNA；

所述728下游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.6的单链DNA；

所述1068C上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.7的单链DNA；

所述1068A上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.8的单链DNA；

所述1068下游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.9的单链DNA；

所述611探针是核苷酸序列是SEQ ID No.10的单链DNA；

所述728探针是核苷酸序列是SEQ ID No.11的单链DNA；

所述1068探针是核苷酸序列是SEQ ID No.12的单链DNA。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括用于检测内参基因的上游引物、用于检测内参基因的下游引物和用于检测内参基因的探针，所述内参基因为人VPS29基因。

3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述用于检测内参基因的上游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.13的单链DNA；所述用于检测内参基因的下游引物是核苷酸序列是SEQ ID No.14的单链DNA；所述用于检测内参基因的探针是核苷酸序列是SEQ ID No.15的单链DNA。

4.根据权利要求1-3中任一所述的组合物，其特征在于，所述611探针、所述728探针、所述1068探针和所述用于检测内参基因的探针的5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团。

5.用于检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的试剂，其特征在于，所述试剂包含权利要求1-4中任一所述的组合物。

6.根据权利要求5所述的试剂，其特征在于，所述试剂还包含尿嘧啶-N-糖基化酶和dUTP。

7.根据权利要求6所述的试剂，其特征在于，所述试剂还包含Taq DNA聚合酶、dNTP、PCR缓冲液、Mg²⁺中的一种或多种。

8.根据权利要求7所述的试剂，其特征在于，所述试剂还包含野生型对照品和突变型对照品，其中野生型对照品为包含611位点的野生型DNA、包含728位点的野生型DNA和包含1068位点的野生型DNA；突变型对照品为包含611位点的突变型DNA、包含728位点的突变型DNA和包含1068位点的突变型DNA。

9.权利要求1-4中任一所述的组合物或权利要求5-8中任一所述的试剂在制备检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的产品中的应用。

10.一种检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

A1)提取待测样品DNA；

A2)以所述DNA为模板，利用权利要求1-4中任一所述的组合物或权利要求5-8中任一所述的试剂进行PCR检测；

A3)根据检测结果判定丙氨酸羟化酶基因是否发生突变。