[发明专利]一种与花生乙烯不敏感以及耐盐相关性状紧密连锁的分子标记及应用

权利要求书

1.一种与花生乙烯不敏感以及耐盐相关性状紧密连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记为InDel标记Arahy01063和/或Arahy01102；

其中，在乙烯敏感且不耐盐的花生中Arahy01063的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，在乙烯不敏感且耐盐的花生中Arahy01063的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

在乙烯不敏感且耐盐的花生中Arahy01102的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，在乙烯敏感且不耐盐的花生中Arahy01102的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

2.权利要求1所述分子标记在花生乙烯不敏感以及耐盐性状筛选中的应用。

3.一种筛选花生乙烯不敏感以及耐盐性状的方法，其特征在于，步骤如下：

提取待筛选花生的基因组DNA作为模板，采用引物对PCR扩增权利要求1所述的Arahy01063和/或Arahy01102分子标记，检测扩增产物；若Arahy01063标记的PCR扩增产物出现单一的163bp大小的特征条带，则判定待测花生材料为乙烯敏感不耐盐，若出现一条179bp大小的特征条带或出现163bp和179bp大小的两条特征条带，则判定待测花生材料为乙烯不敏感且耐盐；

若Arahy01102标记的PCR扩增产物出现182bp大小的特征条带，则判定待测花生材料为乙烯敏感不耐盐；若出现一条171bp大小的特征条带或出现171bp和182bp大小的两条特征条带，则判定待测花生材料为乙烯不敏感且耐盐。

4.根据权利要求3所述筛选花生乙烯不敏感以及耐盐性状的方法，其特征在于，扩增InDel标记Arahy01063的引物序列为：

Arahy01063-F: 5’-AAGCACAGAATATGGGTGGA-3’；

Arahy01063-R: 5’-CACTTCGTCCTTTGCATTCT-3’；

扩增InDel标记Arahy01102的引物序列为：

Arahy01102-F: 5’-GAGTGATGTAGGGATTGTTGAAG-3’；

Arahy01102-R: 5’-TGAAATCACAGAAATACACACAAA-3’。

5.根据权利要求3所述筛选花生乙烯不敏感以及耐盐性状的方法，其特征在于，

所述扩增Arahy01063时PCR的反应程序为：预变性95℃ 4min；94℃ 30s，58℃ 30s，72℃ 25s，35个循环；72℃延伸5min；

所述扩增Arahy01102时PCR的反应程序为：预变性95℃ 4min；94℃ 30s，57℃ 30s，72℃ 25s，35个循环；72℃延伸5min。

6.权利要求3-5任一项所述筛选花生乙烯不敏感以及耐盐性状的方法在花生乙烯不敏感且耐盐品种选育中的应用。

7.一种花生乙烯不敏感且耐盐品种选育的方法，其特征在于，在育种过程中采用权利要求1中所述的Arahy01063和/或Arahy01102分子标记来鉴定真假杂交种或筛选乙烯不敏感且耐盐的花生品种。

8.根据权利要求7所述花生乙烯不敏感且耐盐品种选育的方法，其特征在于，具体步骤如下，

以乙烯敏感且不耐盐和乙烯不敏感且耐盐的花生品种作为亲本进行杂交，采用Arahy01063和/或Arahy01102分子标记来鉴定真假杂交种；筛选的真杂交种与乙烯敏感且不耐盐的亲本连续进行4次回交，每次回交后采用Arahy01063和/或Arahy01102分子标记来筛选具有乙烯不敏感且耐盐性状的子代，最终得到的子代再进行4次自交，每次自交后筛选综合性状良好的单株，并辅助采用Arahy01063和/或Arahy01102分子标记来筛选具有乙烯不敏感且耐盐性状的子代；最终获得的株系用于进一步扩繁材料。