[发明专利]一种仿刺参中海参脑苷脂的分离提取方法

权利要求书

1.一种仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)选取新鲜仿刺参经解剖去肠后粉碎，得到糜肉，向其中加入80％的乙醇水溶液进行回流提取，提取3次，提取液回收，进行浓缩，得浓缩浸膏为总提取物；

(2)将步骤(1)中得到的总提取物，均匀分散在水中，通过正丁醇进行萃取，对正丁醇萃取液进行回收，浓缩，得正丁醇浸膏；

(3)将步骤(2)中得到的正丁醇浸膏通过正相硅胶柱层析,以不同比例氯仿、甲醇和水作为洗脱溶剂进行梯度洗脱，氯仿、甲醇和水的体积比依次为7：1：0.5、6：1：0.5、6：4：0.5、6：5：0.5、4：1：0.5、2.5：1：0.5；再经过薄层色谱分析，选取含量大的部分通过凝胶色谱柱先以氯仿和甲醇作为洗脱溶剂，氯仿：甲醇的体积为1：1，再以甲醇和水作为洗脱溶剂，甲醇和水的体积比为1：1，继续洗脱；之后通过反向硅胶柱层析以体积比为2:1的乙腈和水作为洗脱溶剂进行纯化。

2.根据权利要求1所述的仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，步骤(1)中，所述糜肉与80％的乙醇水溶液的质量为1:7。

3.根据权利要求1所述的仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，步骤(1)中，所述提取时间分别为2小时、1.5小时和0.5小时。

4.根据权利要求1所述的仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，步骤(2)中，所述浓缩的方式为：真空旋转浓缩，浓缩的温度为40℃。

5.根据权利要求1所述的仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，步骤(3)中，所述正相硅胶填料的粒度为200-300目；反向硅胶柱中填料的粒度为50μm。

6.根据权利要求1所述的仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，步骤(3)中，薄层色谱展开剂为氯仿：甲醇：乙酸乙酯，其中氯仿：甲醇：乙酸乙酯体积比为9：2.5：2。

7.根据权利要求1所述的仿刺参中海参脑苷脂的分离方法，其特征在于，步骤(3)中，选取含量大的部分进一步通过多次正反向硅胶柱层析进行分离纯化。