[发明专利]微生物药物敏感性的快速检测方法及检测试剂盒在审
申请号: | 202210032741.2 | 申请日: | 2022-01-12 |
公开(公告)号: | CN114507704A | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
发明(设计)人: | 鲁振坦;王栋;杨显红 | 申请(专利权)人: | 武汉纺织大学 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12Q1/24;B01D69/02;G01N21/31 |
代理公司: | 武汉卓越志诚知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42266 | 代理人: | 戴宝松 |
地址: | 430200 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微生物 药物 敏感性 快速 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1.将待检微生物样品在含有抗菌剂的培养基中恒温培养2-4h,得到菌液;
S2.用纤维分离膜对步骤S1中得到的所述菌液进行过滤富集,将富集了所述待检测微生物的纤维分离膜置于空白的无菌反应器中,然后加入CCK-8显色剂进行显色反应,反应完成后测试吸光度值;所述纤维分离膜为阳离子改性纤维分离膜,由上至下包括孔径为1um-2um和200nm-450nm的纤维膜;
S3.根据吸光度值的高低得到所述菌液中微生物浓度的高低,进而得出所述待检微生物样品对所述抗菌剂的药物敏感性。
2.根据权利要求1所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,在步骤S2中,所述阳离子改性纤维分离膜的表面改性分子为以下结构式中的一种或多种:
3.根据权利要求2所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,所述表面改性分子为:
式中,n为4-8的正整数,且所述纤维分离膜由上至下的表面改性分子的n值逐渐减少。
4.根据权利要求3所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,所述纤维分离膜由上至下依次由孔径为1.5um-2um、1um-1.5um、350nm-450nm、250nm-350nm和200nm-250nm的五层纤维膜热压而成。
5.根据权利要求1所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,在步骤S2中,所述显色反应的时间为1-4h,温度为30-40℃。
6.根据权利要求1所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,在步骤S1中,所述培养基为酵母膏胨葡萄糖培养基。
7.根据权利要求6所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,所述酵母膏胨葡萄糖培养基包括:将酵母膏和蛋白胨溶于去离子水中,高压和121℃下处理20分钟,然后加入葡萄糖溶液;其中,所述酵母膏的含量为(0.5-1.5)wt%,所述蛋白胨的含量为(1.5-2.5)wt%,所述葡萄糖的含量为(1.5-2.5)wt%;所述抗菌剂的含量为(0.5-5)wt%。
8.根据权利要求6所述的微生物药物敏感性的快速检测方法,其特征在于,在步骤S1中,所述待检微生物样品与所述培养基的体积比为1:(50-150)。
9.一种微生物药物敏感性的快速检测试剂盒,其特征在于,包括无菌液体培养基、细菌富集器、细菌显色剂和检测反应空白容器;所述细菌富集器包含权利要求1至8中任一项所述的纤维分离膜和可拆卸滤头。
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