[发明专利]一种四种病毒的核酸检测试剂盒、引物探针组及检测方法有效
申请号: | 202210029938.0 | 申请日: | 2022-01-12 |
公开(公告)号: | CN114032341B | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 陈伟珊;孙江山;吴纯阳 | 申请(专利权)人: | 广州生凌医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 南昌逸辰知识产权代理事务所(普通合伙) 36145 | 代理人: | 刘林艳 |
地址: | 510000 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 病毒 核酸 检测 试剂盒 引物 探针 方法 | ||
本发明提出了一种四种病毒的核酸检测试剂盒、引物探针组及检测方法,其中,轮状病毒的引物为序列RV‑1、RV‑2,探针为序列RV‑3;诺如病毒GI型的引物为序列NVGI‑1、NVGI‑2,探针为序列NVGI‑3;诺如病毒GII型的引物为序列NVGII‑1、NVGII‑2,探针为序列NVGII‑3;札如病毒的引物为序列SaV‑1、SaV‑2、SaV‑3和SaV‑4,探针为序列SaV‑5。本发明检测试剂盒能够同时检测轮状病毒、诺如病毒GI型、GII型、札如病毒四种致病病毒,减少了因为误判选错检测试剂消耗的时间,对疾病的快速确诊有一定的作用。
技术领域
本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及轮状病毒、诺如病毒GI型、GII型、札如病毒四重核酸检测试剂盒、引物探针组及检测方法。
背景技术
轮状病毒、诺如病毒、札如病毒是病毒性肠胃炎中最常见的病原体。
轮状病毒(rotavirus,RV)属呼肠孤病毒科,为球型,有宽壳盖、短幅和薄边的双链RNA病毒,可引起人类和多种动物腹泻,在所有腹泻病毒中感染比列最大。其中A、B、C三组可对人有致病性,A组引起婴幼儿急性胃肠炎常导致婴幼儿重症腹泻,占整个腹泻病的1/4,在发展中国家每年约有60万婴幼儿由于轮状病毒感染引起脱水死亡。
诺如病毒(Norovirus,NV)是一组杯状病毒科的病毒,诺如病毒感染影响胃和肠道,引起胃肠炎或“胃肠流感”。诺如病毒分5个基因组(GⅠ~GⅤ),其中只有GⅠ、GⅡ和GⅣ可以感染人,而GⅢ、GⅤ分别感染牛和鼠。我国目前最常见的诺如病毒为GⅠ、GⅡ型。感染者发病突然,主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻。儿童患者呕吐普遍,成人患者腹泻为多,24h内腹泻4~8次,粪便为稀水便或水样便,无粘液脓血。
札如病毒(Sapovirus,SaV)属于人类杯状病毒(HuCV),能在世界范围内引起人类急性胃肠炎(AGE)的爆发和散发。近年来,SaV在世界范围内引起的非细菌性胃肠炎爆发有增加趋势。
因此,针对疫情的快速暴发、传播范围广的特点,建立灵敏度高、特异性强、检测时间短、检测成本低、操作简单方便、器材要求不高的轮状病毒、诺如病毒GI型、GII型、札如病毒检测技术,对病例的快速识别和疫情的传播控制具有非常重要的意义,对公共卫生和食品安全防控具有重要的价值。
发明内容
本发明的目的在于提出轮状病毒、诺如病毒GI型、GII型、札如病毒四重核酸检测试剂盒、引物探针组及检测方法,能够同时检测轮状病毒、诺如病毒GI型、GII型、札如病毒四种致病病毒,减少了因为误判选错检测试剂消耗的时间,对疾病的快速确诊有一定的作用。
本发明的技术方案是这样实现的:
本发明提供一种轮状病毒、诺如病毒GI型、GII型、札如病毒的引物探针组,
其中,轮状病毒的引物为序列RV-1、RV-2,探针为序列RV-3;其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;
诺如病毒GI型的引物为序列NVGI-1、NVGI-2,探针为序列NVGI-3;其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示;探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示;
诺如病毒GII型的引物为序列NVGII-1、NVGII-2,探针为序列NVGII-3;其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示;探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示;
札如病毒的引物为序列SaV-1、SaV-2、SaV-3和SaV-4,探针为序列SaV-5;其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:10-12所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示;探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:14所示。
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