[发明专利]一种检测非结核分枝杆菌的试剂盒、检测方法及其应用

权利要求书

1.一种非结核分枝杆菌的荧光定量PCR-HRM检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中含有引物组和探针组；

所述引物组的核苷酸序列为：

NMT引物对：

NMT-F：5'-AGAAGACCGACGACGTBGC-3'；

NMT-R：5'-RTCTSGGTGAYCTTYTCSAC-3'；

和人源内标基因引物对：

人源内标基因-F：5'-TAGGGAGTATATAGGTTGGGGAAGTT-3'；

人源内标基因-R：5'-AACACACAATAACAAACACAAATTCAC-3'

所述探针组的核苷酸序列为：

戈尔登分枝杆菌：gordonae-P2探针：5'-CCACCGTGCTGGCGCAGG-3'；

脓肿分枝杆菌：abscessus-P2探针：5'-TTCTTGCCCAGGCCCTGGTCAAG-3'；

鸟分枝杆菌复合群：avium-HSP-P1探针：5'-CACGGTGCTCGCCCAGGCGTTGG-3'；

亚洲分枝杆菌：arisiense-HSP-P1探针：5'-ACGACGGCGACGGTGCTGGCC-3'；

偶发分枝杆菌：fortuitum-HSP-P2探针：5'-TTCTGGCACAGGCCCTGGTT-3'；

嗜血分枝杆菌：haemophilum-HSP-P2探针：5'-CACGACGGCGACGGTGCTG-3'；

胞内分枝杆菌：intercelleulare-HSP-P2探针：5'-CTGGCTCAGGCGTTGGTCC-3'；

堪萨斯分枝杆菌：kansasii-HSP-P2探针：5'-CTCGCGCAGGCGTTGGTCAAAGA-3'；

玛尔摩分枝杆菌：malmoense-HSP-P2探针：5'-CTGGCGCAGGCGCTGGTCAA-3'；

瘰疬分枝杆菌：scrofulaceum-HSP-P3探针：5'-CCACGGTGCTGGCCCAGGC-3'；

苏尔加分枝杆菌：szulgai-HSP-P1探针：5'-CTCGCCCAGGCGCTGGTGCG-3'；

蟾蜍分枝杆菌：xenopi-HSP-P2探针：5'-ACGGCGACCGTGCTGGCGC-3'；

猿猴分枝杆菌：simiae-HSP-P1探针：5'-CTCGCTCAGGCGCTCGTCAA-3'；

龟分枝杆菌：chelonae-HSP-P1探针：5'-TGCTGGCCCAGGCGCTGGTCAAGG-3'；

人源内标基因-P3探针：5'-ACTGCGTGTGGGGTGGTGATGGAGGA-3'；

所述探针组的序列两端分别标有荧光基团和淬灭基团，各探针序列标记的荧光基团和淬灭基团不相同；其中，gordonae、abscessus、kansasii和malmoense探针序列标记的荧光基团都为FAM，avium、arisiense、scrofulaceum和szulgai探针序列标记的荧光基团为HEX，fortuitum、haemophilum、xenopi和simiae探针序列标记的荧光基团为TAMRA，intercelleulare、chelonae和人源内标基因探针标记的荧光基团为CY5；gordonae、abscessus、kansasii、malmoense、avium、arisiense和scrofulaceum的淬灭基团是BHQ1，szulgai和fortuitum的淬灭基团是BHQ2，haemophilum、xenopi、simiae、intercelleulare、chelonae和人源内标基因探针的淬灭基团是BHQ3。