[发明专利]一组标志物、检测模型及其在辐射剂量检测中的应用在审
申请号: | 202210010027.3 | 申请日: | 2022-01-05 |
公开(公告)号: | CN114369655A | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
发明(设计)人: | 王治东;李亚琼;王琪;戚振华;厉卫红;周仕香 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11;G16B25/10;G16B25/20;G16B30/00 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 邓宇 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一组 标志 检测 模型 及其 辐射 剂量 中的 应用 | ||
1.一种用于检测辐射剂量的标志物,其特征在于,所述标志物由AEN基因、DDB2基因、TRIAP1基因和TRAF4基因组成;所述AEN基因的GeneID为64782;所述DDB2基因的GeneID为1643;所述TRIAP1基因的GeneID为51499;所述TRAF4基因的Gene ID为9618。
2.一种辐射剂量的检测模型,其特征在于,以权利要求1所述的标志物为检测目标,通过不同辐射后时间对应的公式来计算辐射剂量,所述模型为Dose2h=1.5129×AEN-1.8314;Dose4h=0.374×D(TRAF4)+0.541×D(DDB2),D(TRAF4)=0.158e0.4637×TRAF4,D(DDB2)=4.6682×DDB2-7.4239;Dose8h=0.111×D(AEN)-0.109×D(TRIAP1)+0.941×D(DDB2)+0.080×D(TRAF4),D(AEN)=0.1685e0.2132×AEN,D(TRIAP1)=0.1956e0.3743×TRIAP1,D(DDB2)=0.6926×DDB2-3.1684,D(TRAF4)=0.0912e1.026×TRAF4;Dose12h=0.616×D(TRIAP1)+0.412×D(DDB2),D(TRIAP1)=0.1147e0.6063×TRIAP1,D(DDB2)=0.2054e0.3563×DDB2;Dose24h=0.5452×TRIAP12-1.6696×TRIAP1+1.2567;所述Dose为辐射剂量(Gy),公式中AEN,TRAF4,DDB2和TRIAP1分别表示各标志物基因的相对拷贝数。
3.一种辐射剂量检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
步骤一、获取用于辐射剂量检测的标志物,所述标志物为权利要求1所述的标志物;
步骤二、建立用于辐射剂量的检测模型,所述模型为权利要求2所述的模型;
步骤三、利用步骤二所述模型检测辐射剂量。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤三包括以下步骤:
(1)采集人外周血作为样品,提取总RNA,反转录为cDNA;
(2)利用AEN基因、DDB2基因、TRIAP1基因和TRAF4基因对应的上下游引物和探针,采用RealTimePCR的TaqMan探针两步法进行qRT-PCR分析;
(3)利用2-ΔΔCT方法对样品中各基因的相对拷贝数进行计算;
(4)根据步骤(3)获得的各基因的相对拷贝数和步骤二所述的检测模型计算辐射剂量。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述AEN基因对应的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;所述DDB2基因对应的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述TRIAP1基因对应的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,下游引物核苷酸序列如SEQID NO.8所示;所述TRAF4基因对应的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示;所述AEN基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;所述DDB2基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述TRIAP1基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;所述TRAF4基因的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述2-ΔΔCT方法中,以β-actin作为内参基因。
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