[发明专利]从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202111680901.6 申请日: 2021-12-31
公开(公告)号: CN114196609B 公开(公告)日: 2023-06-23
发明(设计)人: 周佳;何俊毅;田宝霞;李相前 申请(专利权)人: 淮阴工学院
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/62;C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12P7/625;C12R1/19
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 冒艳
地址: 223003 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 乳酸 合成 大肠杆菌 工程 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌,其特征在于:所述大肠杆菌工程菌通过导入丙酰辅酶A转移酶突变体基因和聚羟基脂肪酸酯合成酶突变体基因的融合表达子,并敲除其基因组醇醛脱氢酶的编码基因adhE获得;融合基因编码的氨基酸序列如SEQ IDNo.3或SEQ ID No.4所示。

2.根据权利要求1所述的从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌,其特征在于:宿主大肠杆菌包括Escherichia coli BL21、MG1655、JM109、DH5α、TOP10、HB101、DH10B或野生型大肠杆菌。

3.根据权利要求1所述的从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌,其特征在于:聚乳酸合成途径中编码该途径中所有基因的载体为pTrc99A系列表达载体、pSTV28系列表达载体、pET21系列表达载体或pBR322系列载体中的一种或几种;增强该途径中所有基因的启动子为trc、T7、lac、trp、tac、λPL启动子中的一种或几种。

4.权利要求1~3任一项所述的从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌在生产聚乳酸中的应用。

5.一种生产聚乳酸的方法,其特征在于:将权利要求1中所述大肠杆菌工程菌株接种到发酵培养基中培养,在发酵过程中限制空气进入,消耗碳源,利用乳酸生产聚乳酸,发酵温度为25-38oC;发酵体系的pH值为3.4-7.0;发酵培养基中的碳源为甘油、葡萄糖和淀粉中的一种或几种;发酵培养基中的氮源为酵母粉、蛋白胨、氨水、铵盐和尿素中的一种或几种。

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