[发明专利]一种用于微滴式数字PCR的油包水液滴及其应用

权利要求书

1.一种用于微滴式数字PCR的油包水液滴，其中所述液滴的水相中包括DSPE-PEG-BSA改性蛋白、质粒模板、探针引物对组合、PCR反应缓冲液，所述液滴的油相中含有氟碳油、硅油和/或矿物油。

2.根据权利要求1所述的油包水液滴，所述DSPE-PEG-BSA改性蛋白在水相中的质量浓度在0.1-5％之间。

3.根据权利要求1所述的油包水液滴，所述氟碳油选自HFE7500、FC40；所述硅油选自PMX-200、5225C；所述矿物油选自正十四烷、正十二烷、正十六烷、碳酸二乙基己酯等。

4.根据权利要求1所述的油包水液滴，所述油相中还包括表面活性剂。

5.一种基于微滴式数字PCR定量测定核酸的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将权利要求1-4任意一项所述的油相加入到反应杯中，将权利要求1-4任意一项所述的水相放入到进样杯中，通过气泵驱动水相进入到微流控芯片中，切割形成油包水微滴；

(2)PCR扩增。

6.根据权利要求5所述的方法，所述核酸为DNA或RNA。

7.根据权利要求5所述的方法，还包括PCR扩增后在荧光显微镜下观察液滴信号的步骤。

8.根据权利要求5所述的方法，所述方法为探针法或染料法。