[发明专利]一种提高蛋白质谷氨酰胺酶酶活的发酵培养基

说明书

本发明公开了一种提高蛋白质谷氨酰胺酶酶活的培养基，包括：α‑乳糖1g/L‑10g/L，多聚蛋白胨15g/L‑25g/L，高分子聚合物1‑20g/L，Na₂HPO₄0.17g/L，KH₂PO₄4.89g/L，MgSO₄·7H₂O 2.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.05g/L，pH 5.8。本发明还公开了一种提高蛋白质谷氨酰胺酶酶活的方法，将解朊金黄杆菌(Chryseobacterium proteolyticum)CGMCC No.10532菌株接入发酵培养基中振荡培养12h‑18h，得到所述蛋白质谷氨酰胺酶的发酵液。本发明通过在发酵培养基中，添加高分子聚合物PEG2000，可使蛋白质谷氨酰胺酶酶活提高60％～80％。

技术领域

本发明属于微生物发酵生产酶的领域，涉及一种提高蛋白质谷氨酰胺酶酶活的发酵培养基。

背景技术

脱酰胺处理是对蛋白质改性的一种方式，通过脱去蛋白质的酰胺基团，减少氢键，同时增加静电排斥力，导致蛋白质空间构象改变，从而提高蛋白质的溶解度，有利于蛋白质乳化性、起泡性等功能特性。由于植物蛋白中谷氨酰胺残留物的含量普遍较高，因此对其脱酰胺是扩大植物蛋白用途和改善其功能的最有希望的方法之一。蛋白质谷氨酰胺酶(Protein-glutaminase)是一种水解蛋白质侧链上的谷氨酰胺残基，并释放氨的新型脱酰胺酶。其作用底物是蛋白质或多肽，且只作用于蛋白质或多肽的谷氨酰胺残基,不会引起蛋白质的水解，也不会导致蛋白质产生交联，因此在食品行业具有非常广阔的应用前景。

目前产蛋白质谷氨酰胺酶野生菌株酶活较低，限制了蛋白质谷氨酰胺酶的工业化应用。选择合适的培养基是菌株发酵获得产物的第一步，在菌株的发酵培养中具有举足轻重的作用。

发明内容

本发明的目的为解决现有产蛋白质谷氨酰胺酶菌株酶活低的难题，提供一种提高蛋白质谷氨酰胺酶(Protein glutaminase，PG)酶活的培养基及其制备方法。本发明通过添加高分子聚合物PEG2000的方式以提高酶活。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种提高蛋白质谷氨酰胺酶酶活的发酵培养基，所述发酵培养基包括：α-乳糖1g/L-10g/L，多聚蛋白胨15g/L-25g/L，高分子聚合物1-20g/L， Na₂HPO₄ 0.17g/L，KH₂PO₄ 4.89g/L，MgSO₄·7H₂O 2.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.05g/L， pH 5.8。

优选地，所述发酵培养基包括：α-乳糖5g/L，多聚蛋白胨20g/L，高分子聚合物5g/L，Na₂HPO₄ 0.17g/L，KH₂PO₄ 4.89g/L，MgSO₄·7H₂O 2.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.05g/L，pH 5.8。

在一个具体实施方案中，所述高分子聚合物为PEG2000。

在一个具体实施方案中，所述高分子聚合物的用量为1-20g/L。

在一个具体实施方案中，所述高分子聚合物的用量为5g/L。

与现有技术相比，本发明所述的发酵培养基成分简单、质量稳定、长期易于获得；本发明所述培养基能够显著提高保藏编号为CGMCC No.10532，于2015 年2月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的解朊金黄杆菌Chryseobacteriumproteolyticum YF810菌株酶活，产物易于分离获取。