[发明专利]鉴别或辅助鉴别大豆油分含量的分子标记及其应用有效
申请号: | 202111572504.7 | 申请日: | 2021-12-21 |
公开(公告)号: | CN114292941B | 公开(公告)日: | 2023-03-14 |
发明(设计)人: | 杨春燕;史晓蕾;赵青松;刘路平;闫龙;杨永庆;张孟臣;魏玉;陈强;赵鑫 | 申请(专利权)人: | 河北省农林科学院粮油作物研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 莫舒颖 |
地址: | 050035 河北省石家庄*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴别 辅助 豆油 含量 分子 标记 及其 应用 | ||
1.检测大豆基因组中SNP的多态性或基因型的物质在A1-A3中的任一种应用,其特征在于,所述SNP为SEQ ID No.1第30位核苷酸,其核苷酸种类为A或G;
A1、在鉴定大豆油分含量中的应用;
A2、在制备鉴定大豆油分含量产品中的应用;
A3、在高油分大豆育种中的应用或在制备高油分大豆育种产品中的应用;
所述大豆属于HJ117×Hobbit的RIL群体、HJ117×中黄13的RIL群体、HJ117×齐黄34的RIL群体或HJ117×徐豆16的RIL群体。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述物质为下述任一种:
D1)所述物质含有扩增包括所述SNP在内的大豆基因组DNA片段的PCR引物;
D2)所述物质为含有D1)所述PCR引物的PCR试剂;
D3)所述物质为含有D1)所述PCR引物或D2)所述PCR试剂的试剂盒;
D4)所述物质含有D1)所述PCR引物和限制性内切酶TaqI;
D5)所述物质为含有D2)所述PCR试剂和限制性内切酶TaqI的试剂。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述PCR引物为扩增SEQ ID No.1所示DNA片段的引物对。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述引物对由P1和P2组成;所述P1为SEQID No.2所示的单链DNA,所述P2为SEQ ID No.3所示的单链DNA。
5.检测大豆基因组中权利要求1中所述的SNP的基因型的方法,其特征在于:为如下Ⅰ或Ⅱ:
Ⅰ、包括如下K1)和K2):
K1)以待测大豆的基因组DNA为模板,采用权利要求3中所述的引物对进行PCR扩增得到PCR产物;
K2)检测步骤K1)得到的PCR产物,根据所述PCR产物确定待测大豆所述SNP的基因型:
所述PCR产物对应SEQ ID No.1第30位的核苷酸只为G的所述待测大豆的基因型为GG;所述PCR产物对应SEQ ID No.1第30位的核苷酸只为A的所述待测大豆的基因型为AA;
Ⅱ、包括如下L1)和L2):
L1)以待测大豆基因组DNA为模板,采用权利要求4中所述的P1和权利要求4中所述的P2组成的引物对进行PCR扩增得到PCR产物;
L2)下述L21)或L22):
L21)以TaqI酶切步骤L1)所得的PCR产物,检测酶切产物的大小,根据所述酶切产物的大小确定待测大豆所述SNP的基因型:
所述酶切产物只为251bp的DNA片段的所述待测大豆的基因型为GG;所述酶切产物只为224bp的DNA片段和27bp的DNA片段的所述待测大豆的基因型为AA;
L22)检测步骤L1)得到的PCR产物的序列,根据所述序列确定待测大豆所述SNP的基因型:
所述PCR产物对应SEQ ID No.1第30位的核苷酸只为G的所述待测大豆的基因型为GG;所述PCR产物对应SEQ ID No.1第30位的核苷酸只为A的所述待测大豆的基因型为AA。
6.鉴定大豆油分含量的方法,其特征在于,以权利要求5的方法检测待测大豆基因型,根据待测大豆的基因型鉴定大豆的油分含量;基因型为GG的待测大豆油分含量高于基因型为AA的待测大豆油分含量;
所述大豆属于HJ117×Hobbit的RIL群体、HJ117×中黄13的RIL群体、HJ117×齐黄34的RIL群体或HJ117×徐豆16的RIL群体。
7.高油分大豆育种的方法,其特征在于:以权利要求5的方法检测待测大豆基因型,选择基因型为GG的大豆作为亲本进行育种;
所述大豆属于HJ117×Hobbit的RIL群体、HJ117×中黄13的RIL群体、HJ117×齐黄34的RIL群体或HJ117×徐豆16的RIL群体。
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