[发明专利]一种结核分枝杆菌核酸检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种结核分枝杆菌核酸检测试剂盒，涉及临床体外检测技术领域。所述检测试剂盒包含样本释放剂、PCR‑酶混合液、PCR‑反应液、稀释液、阴性对照、阳性对照和内标。本发明的结核分歧杆菌试剂盒通过截取结核分歧杆菌核酸的保守序列片段设计了特异性引物以及Taqman探针，在达成现有技术准确性、精密性和特异性效果前提下，优化了检测的灵敏度。

技术领域

本发明涉及临床体外检测技术领域，具体涉及一种结核分枝杆菌核酸检测试剂盒。

背景技术

结核分枝杆菌(M.tuberculosis)俗称为结核杆菌。结核分枝杆菌能通过受损的皮肤、呼吸道和消化道入侵机体，引起全身各器官的结核病，其中肺结核最为常见。据报道，每年约有800万人感染结核分枝杆菌，至少有300万人死亡，对人类健康威胁较大。目前主要依靠实验室诊断和临床体症相结合对结核病作出诊断。早诊断、早发现、早治疗是控制结核病蔓延的有效措施。现有几种检测结核病的方式如直接涂片染色镜检、培养法、解剖实验、PCR扩增技术和ELASA等。

近年来，随着荧光定量PCR技术的不断发展，受到众多科研工作者的重视，已成为检测结核分枝杆菌基因水平的方法之一。

发明内容

本发明提供了一种结核分枝杆菌核酸检测试剂盒。本发明提供的结核分枝杆菌核酸检测试剂盒在达成现有技术准确性、精密性和特异性效果前提下，优化了检测的灵敏度。

为实现上述目的，本发明的一种结核分枝杆菌核酸检测试剂盒是通过以下技术方案实现的：

本发明的一种结核分枝杆菌核酸检测试剂盒，其特征在于，包括样本释放剂、PCR-酶混合液、PCR-反应液、稀释液、阴性对照、阳性对照和内标；所述PCR-反应液包括结核分枝杆菌的引物和Taqman探针；所述结核分枝杆菌的引物由正向引物与反向引物组成，所述正向引物的序列包括：

5’-ATTCATGGACTAACGATCC-3’；或者是

5’-TAACTAGGCATACCCTTAG-3’；或者是

5’-TAACTAGGCATACCCTTAG-3’；

所述反向引物的序列为：

5’-CCGATGGAACTAGGATTC-3’；或者是

5’-ATACCGAATAGCATATACC-3’；或者是

5’-ATACCGAATAGCATATACC-3’；

所述Taqman探针的序列为：

HEX-CAATGTTCCGAGTACACTAA-BHQ1；或者是

HEX-ATCCTAGAATTCCCATAAGC-BHQ1；或者是

HEX-ATCCTAGAATTGCACATA-BHQ1；

所述内标由内标的正向引物与内标的反向引物组成，所述内标的正向引物与内标的反向引物的序列为：

内标的正向引物序列：

5’-CCATTACCGACGACATGCCG-3’；

内标的反向引物序列：

5’-ACGACCTACGAATCCGAATC-3’。

进一步的，所述稀释液作为阴性对照；所述阳性对照为结核分枝杆菌的阳性样本。

进一步的，所述PCR-酶混合液包括下面的组成成分：

进一步的，所述样本释放剂包括下面的组成成分：