[发明专利]用于HPV分型的多靶标核酸检测试剂盒和检测方法有效
申请号: | 202111472349.1 | 申请日: | 2021-12-03 |
公开(公告)号: | CN114381550B | 公开(公告)日: | 2023-04-28 |
发明(设计)人: | 李颖;徐志辰;杨运煌;李涛 | 申请(专利权)人: | 中国科学院精密测量科学与技术创新研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 江丽丽 |
地址: | 430071 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 hpv 靶标 核酸 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种HPV多亚型检测和分型试剂盒,其特征在于,包括RPA引物组合,Cas12a蛋白,crRNA组合以及报告分子,所述的RPA引物组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-18所示,crRNA组合的核苷酸序列如SEQ ID NO. 19-27所示。
2.根据权利要求1所述的HPV多亚型检测和分型试剂盒,其特征在于,还包括多通道微流控芯片,所述的微流控芯片中心为进样孔,进样孔与多个微通道连通,微通道的另一端与出口孔相连。
3.根据权利要求1所述的HPV多亚型检测和分型试剂盒,其特征在于,所述的报告分子为Cas12a剪切前后可促使反应体系产生信号变化的生化分子,包括单链DNA、DNA 发夹结构、DNA G-三链体或DNA G-四链体,报告分子的两端分别标记一个能发生荧光共振能量转移的荧光基团或者两端分别标记一个荧光基团和一个淬灭基团,或者两端标记基于试纸条方式检测的基团,或者标记可以发生电化学反应或等离子体共振的基团、分子或微纳米粒子。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的HPV多亚型检测和分型试剂盒,其特征在于,扩增时RPA引物组合总的终浓度为0.5-1.5 µM。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的HPV多亚型检测和分型试剂盒,其特征在于,扩增时RPA引物组合总的终浓度为1 µM。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的HPV多亚型检测和分型试剂盒,其特征在于,还包括扩增反应液和酶切缓冲液。
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