[发明专利]一种利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对及其应用在审
| 申请号: | 202111440974.8 | 申请日: | 2021-11-30 |
| 公开(公告)号: | CN113999844A | 公开(公告)日: | 2022-02-01 |
| 发明(设计)人: | 刘富中;舒金帅;张映;李淑培;陈钰辉;杨锦坤 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 王艳斋 |
| 地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 利用 indel 分子 标记 鉴定 茄子 显性 单性 结实 基因 引物 及其 应用 | ||
1.一种利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对,其特征在于,所述利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对包括SEQ ID No.1~2所示的核苷酸序列。
2.一种与茄子显性单性结实基因连锁的InDel分子标记,其特征在于,所述与茄子显性单性结实基因连锁的InDel分子标记位于茄子第6号染色体,物理位置为84.35~89.67Mb,其特征序列为SEQ ID No.3所示的核苷酸序列;
所述与茄子显性单性结实基因连锁的InDel分子标记的扩增引物为权利要求1中所述的利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对。
3.一种鉴定茄子显性单性结实基因的试剂盒,其特征在于,所述鉴定茄子显性单性结实基因的试剂盒包括权利要求1所述的利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对;
优选地,所述利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对的浓度为5~15μM。
4.根据权利要求3所述的鉴定茄子显性单性结实基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括缓冲液、DNA聚合酶、dNTPs和Mg2+;
优选地,所述试剂盒还包括标准阳性模板;
优选地,所述试剂盒还包括水。
5.一种鉴定茄子显性单性结实基因的方法,其特征在于,所述方法包括:
使用权利要求1所述的利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对和/或权利要求3或4所述的鉴定茄子显性单性结实基因的试剂盒,对待测模板进行扩增,再进行分析。
6.根据权利要求5所述的鉴定茄子显性单性结实基因的方法,其特征在于,所述扩增前还包括提取待测模板的步骤;
优选地,所述待测模板包括待测茄子植株的基因组DNA。
7.根据权利要求5或6所述的鉴定茄子显性单性结实基因的方法,其特征在于,所述扩增的程序包括:
预变性:90~95℃,3~5min;
循环扩增:90~95℃,20~40s;54~56℃,20~40s;70~75℃,20~40s;循环30~40次;
循环外延伸:70~75℃,5~10min。
8.根据权利要求5~7任一项所述的鉴定茄子显性单性结实基因的方法,其特征在于,所述分析的步骤包括:
根据扩增产物的大小进行判断。
9.根据权利要求5~8任一项所述的鉴定茄子显性单性结实基因的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)提取待测茄子植株的基因组DNA,作为待测模板;
(2)使用权利要求1所述的利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对和/或权利要求3或4所述的鉴定茄子显性单性结实基因的试剂盒,对待测模板进行扩增,所述扩增的程序包括:
预变性:90~95℃,3~5min;
循环扩增:90~95℃,20~40s;54~56℃,20~40s;70~75℃,20~40s;循环30~40次;
循环外延伸:70~75℃,5~10min;
(3)分析:根据扩增产物的大小进行判断。
10.权利要求1所述的利用InDel分子标记鉴定茄子显性单性结实基因的引物对、权利要求2所述的与茄子显性单性结实基因连锁的InDel分子标记、权利要求3或4所述的鉴定茄子显性单性结实基因的试剂盒或权利要求5~9任一项所述的鉴定茄子显性单性结实基因的方法中的任意一种或至少两种的组合在筛选具有显性单性结实基因的茄子种质资源中的应用。
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