[发明专利]一种米曲霉HKS017及其在制备预消化后的饲料中的应用

权利要求书

1.一种米曲霉HKS017，分类命名为米曲霉（Aspergillus oryzae），保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.22414，保藏日期：2021年04月22日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

2.权利要求1所述的米曲霉HKS017在制备预消化后的饲料中的应用，方法是：

（1）制备查氏斜面培养基：方法是，将硝酸钠3.0g、氯化钾0.5g、七水硫酸亚铁0.01g、磷酸氢二钾1.0g、七水硫酸镁0.5g、蔗糖20.0g、琼脂20.0g和水1000mL混匀，调pH6.7，装于容器中，密封，于121℃下灭菌20min，摆斜面，得查氏斜面培养基；

（2）制备斜面菌种：用接种环无菌操作将米曲霉HKS017菌株接种于查氏斜面培养基上，28℃恒温培养，直到斜面上长满绿褐色孢子，得斜面菌种；

（3）制备种子：用接种环无菌操作将斜面菌种接种于种子培养基中，接种量为种子培养基重量的0.30-0.50%，混匀，培养温度为28-30℃，直到麸皮面上长满绿褐色孢子，孢子数为1-3×10⁹个/g，得种子；

所述的种子培养基：豆粕粉5g、玉米粉5g过40目筛后与麸皮90g混匀，加水90mL，装于容器中，密封，于121℃下灭菌25min，得种子培养基；

（4）饲料原料预消化：无菌操作将步骤（3）制备的种子接种于预消化饲料培养基中，接种量为预消化饲料原料重量的0.4-0.6%，混匀，培养温度为28-30℃，培养25h-31h，得预消化饲料原料；

所述的预消化饲料培养基：玉米粉60g，豆粕粉40g，豆粕粉与玉米粉过40目筛后混匀，加水100mL，混匀，装于容器中，密封，于121℃下灭菌25min，得预消化饲料培养基；

（5）预后处理：将经步骤（4）制备的预消化饲料原料50℃恒温烘干，粉碎过40目筛，得预消化后的饲料。

3.根据权利要求2所述的米曲霉HKS017在制备预消化后的饲料中的应用，其特征在于，所述的步骤（3）制备种子是：用接种环无菌操作将斜面菌种接种于种子培养基中，接种量为种子培养基重量的0.40%，混匀，培养温度为29℃，直到麸皮面上长满绿褐色孢子，孢子数为2×10⁹个/g，得种子；

步骤（4）所述的饲料原料预消化是：无菌操作将种子接种于预消化饲料培养基中，接种量为预消化饲料原料重量的0.5%，混匀，培养温度为29℃，培养28h，得预消化饲料原料。

4.根据权利要求2所述的米曲霉HKS017在制备预消化后的饲料中的应用，其特征在于，所述的步骤（3）制备种子是：用接种环无菌操作将斜面菌种接种于种子培养基中，接种量为种子培养基重量的0.30%，混匀，培养温度为30℃，直到麸皮面上长满绿褐色孢子，孢子数为1×10⁹个/g，得种子；

步骤（4）饲料原料预消化是：无菌操作将步骤（3）制备的种子接种于预消化饲料培养基中，接种量为预消化饲料原料重量的0.4%，混匀，培养温度为30℃，培养26h，得预消化饲料原料。

5.根据权利要求2所述的米曲霉HKS017在制备预消化后的饲料中的应用，其特征在于，所述的步骤（3）制备种子是：用接种环无菌操作将斜面菌种接种于种子培养基中，接种量为种子培养基重量的0.50%，混匀，培养温度为28℃，直到麸皮面上长满绿褐色孢子，孢子数为3×10⁹个/g，得种子；

步骤（4）饲料原料预消化是：无菌操作将步骤（3）制备的种子接种于预消化饲料培养基中，接种量为预消化饲料原料重量的0.6%，混匀，培养温度为28℃，培养30h，得预消化饲料原料。

6.权利要求2-5任一项所述的米曲霉HKS017在制备预消化后的饲料中的应用为在养猪业中的应用。