[发明专利]一种同时检测多种猫病原体的试剂盒及其检测方法与应用

权利要求书

1.同时检测多种猫病原体的多重荧光定量PCR引物组和探针组，其特征在于，所述猫病原体包括猫瘟病毒、猫杯状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、猫弓形虫、猫疱疹病毒、猫衣原体和猫支原体；

所述引物组的核苷酸序列为：

猫内源基因引物对：

Feline-F：5’-AGCACGAAAGTAACTTTAACACCTCC-3’；

Feline-R：5’-TGCTAGTAGTTCTCTGGCGGATAG-3’；

猫瘟病毒引物对：

FPV-F：5’-TAGACTAACACATACATGGCAA-3’；

FPV-R：5’-GCTCCTTCAGATTGAGGC-3’；

猫杯状病毒引物对：

FCV-F：5’-TCGCTAAATCATTACCTACTCCC-3’；

FCV-R：5’-CACCAACAAAAGAGAACCCA-3’；

猫传染性腹膜炎病毒引物对：

FIP-F：5’-TTGCTGTTAAAATTTGCCAT-3’；

FIP-R：5’-TTGTCAATACGGTGTCCA-3’；

猫弓形虫引物对：

TOX-F：5’-AATAGCGTTTGTATATAACCA-3’；

TOX-R：5’-TTTGCAGCATTAATCAGT-3’；

猫衣原体引物对：

CP-F：5’-ATACATAGGCATATAAAGCGACAC-3’；

CP-R：5’-TGTTATCGACCCTACAACCCCA-3’；

猫支原体引物对：

MF-F：5’-CTATATATTCTAGCGATTGGA-3’；

MF-R：5’-ATCAAGATTCAAGTCCGA-3’；

猫疱疹病毒引物对：

FHV-F：5’-GTCTGTTTCCCACTCGCAA-3’；

FHV-R：5’-GTTCCTCGATATTCAAGGTTGT-3’；

所述探针组的核苷酸序列为：

猫内源基因探针：

Feline-P：5’-ACTACACGACAGCTAAGA-3’；

猫瘟病毒探针：

FPV-P：5’-AATAGAGCATTGGGCTTACCAC-3’；

猫杯状病毒探针：

FCV-P：5’-CCAATATCAAACCACGAGCCAT-3’；

猫传染性腹膜炎病毒探针：

FIP-P：5’-TCTGATTAAACACGCATTGACCAC-3’；

猫弓形虫探针：

TOX-P：5’-TATCAATTGGATTCGCGCTTT-3’；

猫衣原体探针：

CP-P：5’-TCCCCTTTCGCTCGCCGCTA-3’；

猫支原体探针：

MF-P：5’-TTTATTGCATCGCCACCT-3’；

猫疱疹病毒探针：

FHV-P：5’-TTCCACCAGGAGGTTCTCGT-3’。

2.根据权利要求1所述的引物组和探针组，其特征在于，所述探针组的序列两端分别标有荧光基团和淬灭基团；各探针序列标记的荧光基团和淬灭基团各不相同。

3.一种同时检测多种猫病原体的多重荧光定量PCR试剂，其特征在于，所述试剂中含有权利要求1所述的引物组和探针组。

4.权利要求3所述的多重荧光定量PCR试剂在制备猫病原体检测试剂盒中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述猫病原体检测试剂盒中还包括核酸释放剂、PCR反应液、酶、阴性质控品和阳性质控品中的至少一种。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于，所述猫病原体检测试剂盒的使用方法为：

(1)提取检测样品中的核酸；

(2)使用所述猫病原体检测试剂盒中的引物组和探针组进行PCR扩增；

(3)根据扩增曲线定性或定量样品中的猫病原体。