[发明专利]一种分子包裹萘莫司他及其在治疗三阴性乳腺癌中的应用

权利要求书

1.一种分子包裹萘莫司他大分子复合物mATF-HSA:NM，其特征在于：以mATF-HSA为递送载体，萘莫司他埋在mATF-HSA的HSA内部，mATF-HSA与萘莫司他结合形成大分子复合物mATF-HSA:NM；

其制备方法为利用分子包裹方法进行制备，包括以下步骤：

（1）将mATF-HSA目的基因片段连接至pPICZαA载体上构建获得pPICZα-mATF-HSA重组质粒，pPICZα-mATF-HSA重组质粒转入毕赤酵母菌株X-33构建毕赤酵母基因工程菌X-33，甲醇诱导毕赤酵母基因工程菌X-33表达重组蛋白mATF-HSA，纯化获得重组蛋白mATF-HSA；

（2）将mATF-HSA在20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH8.0溶液中搅拌扩散，按1:5~1:50的摩尔比例逐滴滴加萘莫司他，在4℃冰箱内搅拌12~48小时；

（3）反应结束后用10 kDa截留率的透析袋在PBS溶液中对上述产物进行搅拌透析，达到除去未结合的萘莫司他，并用PBS替换mATF-HSA原始Tris-HCl溶液的目的；

（4）步骤（3）的透析产物mATF-HSA:NM，用10 kDa截留率的超滤浓缩管在3500 rpm条件下进行浓缩；

（5）通过测定荧光变化检测mATF-HSA与萘莫司他成功结合；

所述mATF-HSA目的基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述重组蛋白mATF-HSA，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述mATF源于尿激酶。

2.一种权利要求1所述分子包裹萘莫司他大分子复合物mATF-HSA:NM在制备预防和/或治疗乳腺癌药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述乳腺癌为三阴性乳腺癌。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述大分子复合物mATF-HSA:NM通过抑制尿激酶介导三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述三阴性乳腺癌细胞选自人源三阴性乳腺癌MDA-MB231、鼠源三阴性乳腺癌4T1。

6.一种包含权利要求1所述分子包裹萘莫司他大分子复合物mATF-HSA:NM的预防和/或治疗乳腺癌的药物。

7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于：所述药物的剂型选自片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、注射剂。