[发明专利]与草鱼性状相关的SNP分子标记及其应用

权利要求书

1.检测SNP分子标记的引物在选育体重优异的草鱼品种中的应用，

所述SNP分子标记的序列如SEQ ID NO.2所示，SNP位点位于第410位，多态性为C/T；

若检测草鱼基因序列SEQ ID NO.2的第410位碱基处的SNP位点的基因型是CC，则挑选繁殖。

2.一种筛选体重优异的草鱼的方法，其特征在于，包括以下步骤：

检测草鱼基因序列SEQ ID NO.2的第410位碱基处的SNP位点是否为基因型CC，若是，则挑选繁殖。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取草鱼的DNA；

(2)以提取的DNA为模板，进行PCR扩增实验，获取含有SNP位点的目标片段，检测草鱼基因SEQ ID NO.2第410位碱基的基因型是否为CC。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，

所述的步骤(2)中PCR扩增：使用SNP35-F及SNP35-R引物对进行PCR扩增，得到PCR产物，所述引物的核苷酸序列如下：

SNP35-F：5'-GATATGGATGACTGTCTCTCC -3'（SEQ ID NO.7）；

SNP35-R：5'-CAATCCAGGTCAGATAGTACA -3'（SEQ ID NO.8）；

再将PCR产物使用延伸引物SNP35-P进行PCR延伸扩增，确定草鱼基因SEQ ID NO.2第410位碱基处的基因型；所述延伸引物核苷酸序列如下：

SNP35-P：5'-GTGAAAGGGGGAATACTATAAC-3'（SEQ ID NO.14）。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的PCR扩增体系为：

DNA 1μl；

10×buffer 1.5μl；

25mM 的 MgCl₂ 1.5μl；

10mM 的 dNTP 0.3μl；

上游引物、下游引物各 0.15μl；

Taq 酶0.3μl；

H₂O补至 15μl；

所述的PCR扩增反应条件为：94℃变性15s；54℃退火15s，72℃延伸30s，24个循环。