[发明专利]基于大肠杆菌素E家族DNA酶的蛋白质复合物及其在人工蛋白支架中的应用

权利要求书

1.一种基于大肠杆菌素E家族DNA酶的蛋白质复合物，其特征在于，所述蛋白质复合物中包括：CL2蛋白与Im2蛋白形成的相互作用对，或CL7蛋白与Im7蛋白形成的相互作用对，或CL8蛋白与Im8蛋白形成的相互作用对，或CL9蛋白与Im9蛋白形成的相互作用对中的任意一种或多种；其中，

所述CL2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述CL7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；

所述CL8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示；

所述CL9蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示；

所述Im2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述Im7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；

所述Im8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；

所述Im9蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示。

2.如权利要求1所述的蛋白质复合物在制备多酶复合物体系中的应用，其特征在于，所述多酶复合物体系包括支架蛋白，权利要求1所述的CL2蛋白、CL7蛋白、CL8蛋白、CL9蛋白，以及目的蛋白；

其中，所述支架蛋白中包括：通过linker依次串联的纤维素结合模块CBM3a，Im2蛋白，Im7蛋白，Im8蛋白以及Im9蛋白；

所述支架蛋白上的各Im蛋白模块可与相应的CL蛋白连接形成相互作用对，通过将目的蛋白与CL蛋白连接，实现目的蛋白在支架蛋白上的有序装配。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述纤维素结合模块CBM3a来源于热纤梭菌Clostridium thermocellum。

4.如权利要求2所述的多酶复合物体系在水解纤维素底物中的应用，其特征在于，所述多酶复合物体系中包括：4个CL-tagged纤维素酶以及支架蛋白，4个CL-tagged纤维素酶与支架蛋白上对应的Im蛋白模块连接形成相互作用对，即得到所述多酶复合物；

其中所述4个CL-tagged纤维素酶包括：与CL2蛋白连接的外切葡聚糖酶，与CL7蛋白连接的内切葡聚糖酶突变体，与CL8蛋白连接的内切葡聚糖酶，以及与CL9蛋白连接的β-葡萄糖苷酶；

所述CL2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述CL7蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.5所示，所述CL8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述CL9蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。