[发明专利]一种裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法有效
| 申请号： | 202111208051.X | 申请日： | 2021-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN113940275B | 公开（公告）日： | 2023-05-09 |
| 发明（设计）人： | 杨海峰;王佳琪;萨如拉;王树森;甘晓雪;郝璞;张新乾;樊俐娇;刘璐;查苏;谢丕青;王佳濛 | 申请（专利权）人： | 内蒙古农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京市广友专利事务所有限责任公司 11237 | 代理人： | 耿小强 |
| 地址： | 010018 内蒙古自*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 果木 器官 发生 途径 组织培养 再生 体系 建立 方法 | ||
1.一种裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法，包括如下步骤：
(1)外植体的消毒
裸果木茎段截成短枝，置于容器内，流水冲洗，取出，放入超净工作台内，酒精清洗，无菌水清洗，4％次氯酸钠消毒，无菌水清洗，无菌滤纸吸干水分；
(2)初代愈伤诱导培养
将消毒后的茎段接种到初代培养基内，诱导形成愈伤；初代培养基为1/2MS+0.1mg/LIBA+0.05mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH控制在5.85-5.95；
(3)不定芽诱导培养
将步骤(2)形成的愈伤组织接种到含琼脂的培养基内，诱导愈伤组织形成不定芽；所述培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH控制在5.85-5.95；
(4)不定芽继代培养
将步骤(3)含不定芽的愈伤块接种到MS+0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基内，pH控制在5.85-5.95，温度25±2℃，光照时间16h/d，光照强度2500LX，诱导不定芽继续分化，长出丛芽；
(5)生根培养
将步骤(4)获得的不定芽分别接种到含琼脂的培养基内，进行生根培养；所述培养基为SH+10g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH控制在5.85-5.95；
(6)苗木再生
待步骤(5)不定芽幼根长至3～4cm时，打开瓶盖，洗净培养基后移栽到泥炭：河沙：珍珠岩＝2:2:1体积比的基质内培养。
2.根据权利要求1所述的裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法，其特征在于：步骤(1)所述流水冲洗10h以上。
3.根据权利要求1所述的裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法，其特征在于：步骤(1)所述酒精洗2遍，无菌水清洗2遍，4％次氯酸钠消毒2次，每次5分钟，无菌水清洗6-8次。
4.根据权利要求1所述的裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法，其特征在于：步骤(2)中温度为25±2℃，光照16h/d，光照强度2500LX。
5.根据权利要求1所述的裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法，其特征在于：步骤(3)中，温度25±2℃，光照时间16h/d，光照强度2500LX。
6.根据权利要求1所述的裸果木器官发生途径的组织培养再生体系建立的方法，其特征在于：步骤(5)中，温度25±2℃，光照时间16h/d，光照强度2500LX。
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