[发明专利]一种CAR-T细胞培养用的培养基及其应用有效
| 申请号： | 202111094566.1 | 申请日： | 2021-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN113943710B | 公开（公告）日： | 2023-03-24 |
| 发明（设计）人： | 黄河;孔德麟;赵梦雨;韦聪 | 申请（专利权）人： | 浙江大学医学院附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/0783;C12N15/867 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 310003*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 car 细胞培养 培养基 及其 应用 | ||
1.一种CAR-T细胞培养用的培养基在CAR-T细胞的构建及培养中的应用，所述培养基由基本培养基和达托霉素组成，达托霉素的使用浓度为20~100μM，
基本培养基为：10%体积比的胎牛血清、100U/ml的青霉素、100μg/ml的链霉素以及200U/ml的白介素2，余量为RPMI 1640培养基。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，达托霉素的使用浓度为50~100μM。
3.一种CAR-T细胞的构建及培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）准备制备CAR-T细胞所需的T细胞；
（2）利用含有CAR基因表达序列的慢病毒侵染步骤（1）中的T细胞，制成CAR-T细胞；
（3）对步骤（2）制备的CAR-T细胞进行培养，培养时使用CAR-T细胞培养用的培养基，所述培养基由基本培养基和达托霉素组成，达托霉素的使用浓度为20~100μM，
基本培养基为：10%体积比的胎牛血清、100U/ml的青霉素、100μg/ml的链霉素以及200U/ml的白介素2，余量为RPMI 1640培养基。
4.如权利要求3所述CAR-T细胞的构建及培养方法，其特征在于，达托霉素的使用浓度为50~100μM。
5.如权利要求3所述CAR-T细胞的构建及培养方法，其特征在于，步骤（3）中，从转入CAR基因后的第6~12天开始使用所述培养基进行培养。
6.如权利要求5所述CAR-T细胞的构建及培养方法，其特征在于，步骤（3）中每1~3天更换一次所述培养基。
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