[发明专利]筛选转基因植物的组合物和方法在审
| 申请号： | 202111029399.2 | 申请日： | 2021-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN113621644A | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | 王益行;吕晓荣;宋淼泉;凌建群 | 申请（专利权）人： | 杭州先端生物科技有限公司;江苏吉锐生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12N15/53;C12N15/54;C12N5/10;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/46;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310015 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 筛选 转基因 植物 组合 方法 | ||
1.筛选转基因植物的载体，所述载体包含DFR、LDOX、UFGT基因，所述DFR的基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述LDOX的基因序列如SEQ ID NO.2所示，所述UFGT的的基因序列如SEQID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的载体，还包括其他标记基因。
3.如权利要求2所述的载体，所述标记基因选自以下基因中的1种、2种，或3种：潮霉素除草剂抗性基因、卡那霉素抗生素抗性基因，氨苄青霉素抗生素抗性基因。
4.如权利要求1-3所述任一载体，所述植物为双子叶植物或单子叶植物。
5.如权利要求4所述的载体，所述植物为水稻。
6.包含权利要求1-3，5所述任一载体的宿主细胞。
7.包含权利要求4所述任一载体的宿主细胞。
8.如权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于：所述的DFR、LDOX、UFGT基因可以分别位于2个或3个载体中，也可以位于同一个载体中。
9.如权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于：所述的DFR、LDOX、UFGT基因可以分别位于2个或3个载体中，也可以在同一个载体中。
10.如权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物。
11.如权利要求7-9所述的任一宿主细胞，其特征在于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物。
12.如权利要求10所述的宿主细胞，其特征在于：所述植物为水稻。
13.如权利要求11所述的宿主细胞，其特征在于：所述植物为水稻。
14.筛选转基因植物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）构建含有如权利要求1所述的DFR、LDOX、UFGT基因和外源基因的载体；
2）将步骤1）构建的载体转入植物愈伤组织中，获得含有DFR、LDOX、UFGT和外源基因的愈伤组织；
3）添加DFR基因编码的酶的底物；
4）挑选显色的愈伤组织。
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于：还增加如下步骤，将挑选出的愈伤组织，于去除所述酶底物的培养基中培养1-5天；挑选颜色褪去的愈伤组织颗粒。
16.如权利要求15所述的方法，其特征在于：还增加如下步骤，对颜色褪去的愈伤组织颗粒，重复权利要求14的步骤3）、4），直到所有愈伤组织颗粒均全部完全显色。
17.如权利要求14-16所述任一的方法，其特征在于：所述步骤1）还包括其他的标记基因。
18.如权利要求17所述任一的方法，其特征在于：所述标记基选自以下基因中的1种、2种，或3种：潮霉素除草剂抗性基因、卡那霉素抗生素抗性基因，氨苄青霉素抗生素抗性基因。
19.如权利要求14-16,18所述的任一方法，其特征在于：所述酶的底物为二氢杨梅黄酮、二氢槲皮素或二氢堪非醇。
20.如权利要求17所述的方法，其特征在于：所述酶的底物为二氢杨梅黄酮、二氢槲皮素或二氢堪非醇。
21.如权利要求14-16所述的任一方法，其特征在于：经转基因处理后的植物愈伤组织颜色与未经处理的野生植物愈伤组织颜色，可肉眼清晰分辨。
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