[发明专利]一种基于KASP的用于糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于KASP的用于糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒，属于医药技术领域。该SNP试剂盒包括一组或多组用于扩增7个基因的7个SNP位点的KASP引物组，所述7个基因的7个SNP位点分别为EDN1基因的RS5370位点、CFH基因的RS800292位点、AGER基因的RS1800625位点、OPG基因的RS3134069位点、IL10基因的RS1800896位点、VEGFA基因的RS2010963位点和RAGE基因的RS2070600位点。本发明可以快速、准确地检测出糖尿病患者的糖尿病视网膜病变，具有特异性强、灵敏度高、准确性强和通量高等优点。

技术领域

本发明涉及一种基于KASP的用于糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒，属于医药技术领域。

背景技术

糖尿病(Diabetes Mellitus，简称DM)是一种慢性内分泌代谢性疾病，以高血糖为主要特征，伴有脂肪、蛋白质代谢紊乱等症状。根据发病机制的不同，糖尿病分为1型、2型、特异型和妊娠糖尿病4类。糖尿病患者长期存在的高血糖会导致全身各组织器官的微血管，包括眼底视网膜上的微血管，变得脆弱。糖尿病引发的视网膜并发症，被称为糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,简称DR)，简称“糖网”，是一类可引起严重视力损害甚至失明的慢性、进展性眼部疾病。我国每年有很多糖尿病患者并发糖尿病视网膜病变而引起视力下降，导致生活质量下降，很多糖尿病患者仅仅因为不能及时随诊观察，导致视力出现不可逆的损害。

SNP(Single Nucleotide Polymorphisms,即单核苷酸多态性)，作为第三代分子标记物，是在基因组上单个核苷酸的变异形成的遗传标记，具有密度高、多态性丰富和二等位基因性等特点。在人类基因组中大概每1000个碱基就有一个SNP位点，在疾病相关基因的鉴定、药物的设计和测试中作为强有力的检测工具。

对糖尿病视网膜病变患者的血清进行SNP检测，筛查致病基因，可以对临床糖尿病病人的早期随访和用药指导提供预测性依据，也能为将来的基因调控表达治疗提供数据支持。传统SNP检测方法，如DNA测序、RFLP、SSCP和ASO等，操作复杂，易出错；Taqman方法、质谱分析、DNA芯片、SNaPshot法等，有高效快速的优点，但需要投入昂贵设备或者高成本的试剂，也难以普及应用

KASP(Kompetitive AlleleSpecific PCR，即竞争性等位基因特异性PCR)技术，是基于引物末端碱基的特异匹配来对SNP分型以及检测InDels(Insertions and Deletions，即插入和缺失)，可在广泛的基因组DNA样品中，甚至是一些复杂基因组的DNA样品中，对SNPs和特定位点上的InDels进行精准的双等位基因判断，具有高度稳定性与准确性的特点。但KASP分子标记的开发需要综合考虑目的区段DNA变异、多态性等因素，标记开发的成功率较低。

现有技术中，虽然也有糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒，但存在如下缺陷：一是涉及检测的基因位点不够全面，检测结果存在偏差；二是没有基于KASP技术，检测周期长，不能进行批量检测。

鉴于此，有必要提供一种基于KASP技术的用于糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒，以解决现有技术的不足。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种基于KASP的用于糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种基于KASP的用于糖尿病视网膜病变基因检测的SNP试剂盒，包括一组或多组用于扩增7个基因的7个SNP位点的KASP引物组，所述7个基因的7个SNP位点分别为EDN1基因的RS5370位点、CFH基因的RS800292位点、AGER基因的RS1800625位点、OPG基因的RS3134069位点、IL10基因的RS1800896位点、VEGFA基因的RS2010963位点和RAGE基因的RS2070600位点。