[发明专利]一种IgG N-糖链特征组合及其应用

说明书

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种IgG N‑糖链特征组合及其应用，所述IgG N‑糖链特征组合包括H3N4F1、H5N4F1、H5N5F1、G0/G2、Gal‑ratio、agal、H4N4、H5N4、Fucosylation中的至少两种。同时，本发明提供了检测所述IgG N‑糖链特征组合的试剂和/或仪器在诊断受试者是否是慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者、预测慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者的预后、判断心血管指标高低中的应用。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种IgG N-糖链特征组合及其应用。

背景技术

慢性血栓栓塞性肺动脉高压(Chronic thromboembolicpulmonaryhypertension，CTEPH)是急性肺栓塞(acute pulmonary embolism，APE)或肺动脉原位血栓形成后，血栓因种种原因未溶解而持续存在，通过纤维化而导致肺血管阻塞的后果。CTEPH的发生率虽较低，但预后很差，持续升高的肺血管阻力最终会使患者发展至右心功能衰竭而死亡。研究数据显示，肺动脉压力高低与预后密切相关。

目前，肺动脉血栓内膜剥脱术(Pulmonary Endarterectomy，PEA)是CTEPH的首选治疗方案，效果明显。然而，就目前CTEPH的诊治情况，大部分患者就诊时已处于中晚期，其中有37％的患者因肺远端血管存在血栓、继发性肺小血管病或其它严重疾病不适合手术。

糖基化影响多种蛋白质生物学功能，包括蛋白质折叠，稳定性和活性。糖链的结构多样性使这些变化的功能得以实现，这些糖链源于单糖结构单元的组成，各种化学键合类型和分支。糖基化的最普遍形式是N糖基化和O糖基化，N糖基化过程中寡糖与天冬酰胺的侧链氨基部分(-NH₂)的氮原子连接，而O糖基化过程中，寡糖与丝氨酸或苏氨酸的羟基部分(-OH)的氧原子连接。尽管IgG糖基化在许多生理和病理过程中起着关键作用，但在临床和免疫学研究中，对IgG糖基化的监测往往被忽视。

N-聚糖的分析可通过几种可释放N-聚糖的酶来辅助。其中，最著名的是肽N-糖苷酶F(PNGase F)，这是一种酰胺酶，通过在N-聚糖最内侧的N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间进行切割而释放出完整的高甘露糖型、复杂型和杂合型的N-聚糖。

基质辅助激光解析电离质谱技术诞生于80年代末期，是一种软电离质谱技术，具有样品不易裂解、分子离子峰强、灵敏度高等特点，该技术为分析强极性、热不稳定和难挥发的生物样品提供了新途径，逐渐成为分析蛋白样品、多肽、核酸的首选方法。

发明内容

本发明公开了IgG N-糖链特征组合在诊断受试者是否是CTEPH患者、预测CTEPH患者的预后、判断受试者心血管指标是否正常中的应用。同时提供了CTEPH诊断和预后评估的产品和方法。

本发明在具体实施例中通过血浆中IgG分离、IgG上的N-糖链游离和质谱检测，比较CTEPH与健康对照血浆中IgG上N-糖表达量差异。发现健康对照与CTEPH患者血浆之间有6种IgG N糖特征(glycan traits)(3种直接检测到N糖特征和3种派生糖链特征)表达量存在显著差异。

上述6种差异糖链特征的联合应用可以有效区分CTEPH和健康对照；同时H4N5、H5N5和岩藻糖基化(Fucosylation)的表达量和多种心血管指标具有线性关系，由于所述心血管指标具有预后的功能，相应地，所述H4N5、H5N5和岩藻糖基化表达量具有预后的潜力。

IgG N-糖链特征组合

一方面本发明提供了一种IgG N-糖链特征组合，所述IgG N-糖链特征包括糖链派生特征和/或直接检测到的糖链；