[发明专利]一组大麻SSR分子标记及其应用

说明书

本发明涉及农作物分子生物学技术领域，具体涉及一组大麻SSR分子标记及其应用。本发明提供一组大麻SSR分子标记，共11个SSR分子标记，还提供一套适于毛细管电泳平台的检测所述SSR分子标记的引物组合。利用这11个SSR分子标记可以：鉴定大麻品种及分析遗传多样性；区分庆大麻3号和汉麻7号、龙大麻5号和火麻一号、龙麻1号和尤纱‑31等品种。通过本发明的大麻SSR分子标记的应用，能够在基因组水平上拓展大麻可用标记位点的范围；为大麻品种、种质资源鉴定，亲缘关系评价，细胞质遗传特性等研究提供新工具，应用前景良好。

技术领域

本发明涉及农作物分子生物学技术领域，具体涉及一组大麻SSR分子标记及其应用。

背景技术

大麻(Cannabis sativa L.)是一种传统经济作物，主要用于纺织和榨油，是大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)一年生草本植物。大麻作为一种具有特殊功效的经济作物，其皮、秆、籽、根、叶、花均具有利用价值，在纺织、食品、造纸、建筑、医药、交通运输和国防军工等方面应用广泛。尤其是大麻中的大麻二酚(CBD,cannabidiol)，其属于萜酚类化合物，具有丰富的药理学作用。由于大麻中致幻成分四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol，THC)易被不法分子利用，因此，降低THC含量成为大麻育种的重要指标之一。为了与毒品大麻进行区分，将THC含量低于0.3％的大麻品种称为工业大麻(Industrial hemp)。

由于大麻在工业中的广泛应用，其种植和育种技术也在不断改进，越来越多的大麻品种不断涌现。尤纱-31是中国从乌克兰引进的大麻品种，具有纤维含量高的特点。庆大麻3号、汉麻7号、龙大麻5号、火麻一号和龙麻1号都是中国经过育种改良的杂交品种。庆大麻3号属于纤用大麻，纤维含量相对较高；汉麻7号属于药用大麻，CBD含量相对较高，但二者在育种过程中有相同的祖先，即遗传背景相似，因此在遗传育种前需要对二者进行品种区分。龙大麻5号和火麻一号也是类似情况，遗传背景相似，也需要进行二者的区分和鉴定。龙麻1号和尤纱-31属于纤维含量相对较高的品种，二者的种子在外观上十分相似，难以分辨，两者在育种时非常容易发生田间种植混乱、授粉漂移所引起的种子混淆，因此在种子收获后进行品种鉴定同样是必须的工作。汉麻7号、龙大麻5号和龙麻1号都属于THC含量相对更低的优势品种，THC含量的高低对大麻在市场上的价值有很大影响，为了严格合理地使用品种，在流入市场前必须对品种进行严格的鉴定，保证种子的纯度。各品种的特性及品种鉴定缘由见表1。

这些大麻品种的区分给大麻品种鉴定工作带来新的考验。传统的品种鉴定是根据种子、幼苗及植株的形态特征和农艺形状进行鉴定的，主要测试品种的特异性、一致性和稳定性。但这些鉴定方法存在时间长、工作量大、准确度不高、占用土地等应用局限性问题，同时这种方法也只适用于品种间差异明显的样品的鉴定。而分子技术进行品种鉴定则具有快速高效、不受环境影响、可用标记多等优点。SSR(Simple Sequence Repeat，SSR)简单重复序列，也称为微卫星DNA(Microsatellite DNA)，由1-6个碱基为重复单位，形成长达数十个核苷酸的串联重复序列，如(AT)n、(AC)n、(GA)n、(AAG)n、(AAT)n、(CATG)n等。微卫星序列广泛分布于植物基因组中，且SSR序列在不同物种中长度、重复单位次数、突变情况有所不同，在染色体上的分布也存在差异，等位基因的多样性也由此形成。基于PCR的SSR标记技术具有成本低、简单易行、稳定、高效等优点，已广泛应用于动植物群体分析、构建DNA指纹图谱、品种鉴定以及辅助育种等多个方面，是有效鉴别品种真实性的理想方法。

表1各品种的特性及品种鉴定缘由

发明内容

本发明的目的是提供一组大麻SSR分子标记及其扩增引物。本发明的另一目的是提供大麻SSR分子标记及其扩增引物的应用。

本发明的目的是提供适用于毛细管电泳检测技术的一组大麻SSR分子标记。