[发明专利]一种组合物及其试剂盒在检测甘胆酸中的用途

说明书

一种组合物及其试剂盒在检测甘胆酸中的用途，所述组合物包含由甘胆酸与生物素结合而成的甘胆酸‑生物素衍生物。本发明基于免疫比浊法平台，设计了一种甘胆酸检测试剂盒，其中的甘胆酸‑生物素小分子的合成方法快速简便，且利用生物素‑亲和素结合的结合特点，设计全新的反应原理，克服现有技术的不足，甘胆酸‑生物素小分子无需与大分子蛋白或微球结合，直接作为竞争物应用到胶乳免疫比浊平台中，避免了大分子竞争物制备的繁琐过程。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，具体涉及一种组合物及其试剂盒在检测甘胆酸中的用途。

背景技术

甘胆酸(Cholyglycine,CG)是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸。甘胆酸主要合成于肝脏中，会随着胆汁排进肠道，正常情况下，血液中的甘胆酸浓度极低。

甘胆酸的结构式如下：

当肝细胞受损时，肝细胞摄取甘胆酸能力下降，致使血液中甘胆酸含量增高；当胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍，而返流血液循环的甘胆酸含量增高，也使血液中甘胆酸含量增高。因此，血液中甘胆酸是评价肝细胞功能及其肝胆系物质循环功能的敏感指标之一。另外，甘胆酸是诊断和评估妊娠期肝内胆汁淤积症(Intrahepatic Cholestasia ofPregnancy，ICP)患者早期敏感性的理想指标之一。ICP是妊娠中、晚期特有的并发症，是一种可逆的胆汁淤积性肝病，主要临床表现为妊娠中晚期出现皮肤瘙痒、黄疸。ICP患者胆汁排泄障碍会导致甘胆酸在外周血循环中堆积，致使血液中甘胆酸含量增高。

目前临床上应用的甘胆酸检测方法主要为均相酶免疫法、化学发光法、免疫比浊法。其中均相酶免疫法存在热稳定性差，易受样品中的内源性酶的干扰的缺点。化学发光法灵敏度高、线性宽，但成本高，仪器要求高，且竞争物制备和发光标记工序繁琐。免疫比浊法检测速度快、成本低，但由于抗体与小分子直接结合无法形成浊度，灵敏度偏低，需采用竞争法。其中，竞争物的制备繁琐，小分子需进行改造后与大分子蛋白或微球结合后形成竞争物，才能与抗体结合形成浊度。图1所示为已公开的甘胆酸检测试剂(胶乳免疫比浊法)反应原理图。公开号为CN105301255B、CN105988000A、CN106841596A、CN108982860A、CN109444399A、CN109557301A、CN112285345A的中国专利中公开的甘胆酸检测试剂(胶乳免疫比浊法)，竞争物为甘胆酸-蛋白或甘胆酸-蛋白-微球，在制备该竞争物的过程中需要活化、蛋白偶联、脱盐纯化；或活化、微球偶联、封闭、洗涤等过程，十分繁琐。

发明内容

根据第一方面，在一实施例中，提供一种组合物，所述组合物包含由甘胆酸与生物素结合而成的甘胆酸-生物素衍生物。

根据第二方面，在一实施例中，提供一种组合物，所述组合物中含有由可与甘胆酸特异性结合的抗体与胶乳微球结合而成的抗体-微球复合物、由结合蛋白与胶乳微球结合而成的结合蛋白-微球复合物。

根据第三方面，在一实施例中，提供一种试剂组合，所述试剂组合包含第一试剂、第二试剂中的至少一种；所述第一试剂包含由甘胆酸与生物素结合而成的甘胆酸-生物素衍生物，所述第二试剂包含由可与甘胆酸特异性结合的抗体与胶乳微球结合而成的抗体-微球复合物、由结合蛋白与胶乳微球结合而成的结合蛋白-微球复合物。

根据第四方面，在一实施例中，一种试剂盒，所述试剂盒包含第三方面所述试剂组合。

根据第五方面，在一实施例中，提供第一方面所述组合物，或第二方面所述组合物，或第三方面所述试剂组合，或第四方面所述试剂盒在检测甘胆酸中的用途。