[发明专利]用于β-淀粉样蛋白体内检测的复合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种用于β‑淀粉样蛋白体内检测的复合物及其制备方法与应用。本发明提供的用于β‑淀粉样蛋白体内检测的复合物，由经乳铁蛋白、转铁蛋白和其他类型转运受体中至少一种修饰的介孔硅与小分子探针掺杂而成；所述小分子探针选自硫磺素T、SZIs中的至少一种。本发明开创性的将SZIs小分子探针用于β‑淀粉样蛋白的检测，并提出一种经修饰介孔硅/小分子探针的纳米复合物的通用策略，辅助SZIs、ThT等小分子探针高效率穿过血脑屏障，使得利用这些小分子探针对脑部的β‑淀粉样蛋白进行体内实时成像成为可能。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种用于β-淀粉样蛋白体内检测的复合物。

背景技术

阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性疾病，其主要病理特征是神经元功能的进行性丧失。β-淀粉样蛋白(Aβ)是淀粉样前体蛋白 (APP)的蛋白水解产物，是AD病理过程中的致病因素之一。Aβ包括许多亚型，人体内最常见的Aβ亚型是Aβ_1-40和Aβ_1-42。Aβ_1-40和Aβ_1-42都经历从单体、寡聚体到聚集体的转变。Aβ_1-42比Aβ_1-40具有更大的毒性并且更容易形成聚集体，这种聚集体会造成Aβ在脑部的沉积，进而导致产生神经毒性，AD的进展与导致的神经毒性密切相关。因此，Aβ_1-42是AD早期诊断的重要生物标志物。

目前，AD的临床诊断方法主要基于正电子发射断层扫描(PET) 和单光子发射计算机断层扫描(SPECT)两种。这两种方法均需要含有放射性核素的探针作为造影剂，且由于放射性核素的存在，可能不利于人体健康。此外，这两种方法的数据采集时间过长，花费较高。与这两种方法相比，光学成像不使用放射性核素，可以对大脑进行实时成像。然而，大脑有一个先天屏障来维持大脑内部微环境的稳态，称为血脑屏障(BBB)。BBB由脑毛细血管内皮细胞(BCECS)、周细胞、星形胶质细胞和神经元细胞的紧密连接形成。BCECS之间的紧密连接阻止了化合物从血液到大脑的细胞旁转运。因此，几乎100％的大分子和98％以上的有机小分子都被BBB阻断。Aβ_1-42通常积聚在大脑海马和皮层，由于血脑屏障的存在，体内Aβ_1-42的成像和诊断变得十分困难。

商业探针硫磺素T(ThT)是一种用于体外海马和皮层染色的标准探针之一，用于确认Aβ的存在。因此，ThT已成为AD成像和诊断的金标准探针之一。虽然ThT在检测Aβ方面具有一些优势，但它也有几个内在的缺陷，例如BBB渗透性差(脂水分配系数Log P＝ -0.14)、发射波长短(PBS中的λ_em＝490nm)。血脑屏障通透性受多种因素影响，这主要包括物质的亲酯性和亲水性、有机小分子的分子量，物质与血浆蛋白的结合程度等。然而，物质的血脑屏障通透性的实际情况很复杂，上述因素也是仅供参考的可能的影响因素，并不能仅仅根据这些因素来判断物质能否穿过血脑屏障。通常，Log P值介于2和 5之间且分子量小于500Da的探针，具有近红外区域的发射波长，对于穿透BBB和促进体内脑成像至关重要。由于ThT具有较低的Log P 值(Log P1)，其无法穿过BBB，因此只能用于对Aβ的体外检测。

在开发用于Aβ检测的荧光探针的过程中，不免会遇到有一些检测性能良好的探针，但是由于同样无法穿透BBB，尚无法用于体内Aβ的实时检测。

因此，亟需开发一种递送这类小分子探针穿过血脑屏障的通用策略，以解决探针无法在体内实时成像Aβ这一问题。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是通过改变小分子探针的发射波长，在保证小分子探针对Aβ的检测能力的同时，解决其不能穿过血脑屏障这一关键问题。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：