[发明专利]基于环境DNA的岩原鲤实时荧光PCR扩增引物、探针及检测方法有效
| 申请号： | 202110966623.4 | 申请日： | 2021-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN113667762B | 公开（公告）日： | 2023-02-10 |
| 发明（设计）人： | 何文平;闫卉果;董智玲;张连博;马婷婷 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重庆晶智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 50229 | 代理人： | 李靖 |
| 地址： | 402460 重庆*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 环境 dna 岩原鲤 实时 荧光 pcr 扩增 引物 探针 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于环境DNA的岩原鲤实时荧光PCR扩增引物和探针的组合物，其特征在于：所述实时荧光PCR扩增引物的上游引物为YYLF1、其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，下游引物为YYLR1、其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述探针为YYL-MGB1、其核苷酸序列如SEQ IDNo.3所示。
2.采用如权利要求1所述组合物对基于环境DNA的岩原鲤的检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR扩增体系为20μL，包括10μL 2×TaqMan Fast qPCR Master Mix ，2μL DNABuffer ，上下游引物YYLF1和YYLR1各0.4μL，浓度为10μmol/L，YYL-MGB1探针0.4μL，浓度为10μmol/L，DNA模板1μL，超纯水补至20μL。
3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR反应程序为：预变性94℃ 3min；然后94℃ 5sec，60℃ 30sec 循环40 次。
4.一种用于检测岩原鲤的试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括如下引物和探针：上游引物YYLF1核苷酸序列如SEQ ID No.1所示 ，下游引物YYLR1核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，探针YYL-MGB1：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示 。
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