[发明专利]一种融合蛋白疫苗组合物及其制备方法

说明书

本发明公开了一种融合蛋白疫苗组合物及其制备方法，属于兽用蛋白疫苗技术领域，该融合蛋白疫苗组合物，由抗原蛋白混合物和佐剂按用量比200‑300μg：1g组成，抗原蛋白混合物包括多种抗原蛋白，佐剂包括如下原料：白矿油、乳化剂、稳定剂、络合剂、增效剂、去离子水；该佐剂为一种水包油型乳剂可以对疫苗起到很好的保护作用，且添加了一种增效剂，由酶解后的壳聚糖为基体改性制备，具有抗氧化活性的酚羟基与巯基，酚羟基还具有抗菌活性，一方面可以有效延长疫苗组合物的保存期限，且在使用时可以有效的对猪体内的自由基进行清除，可以有效提升猪的机体性能，对疫苗的效用起到增强效果，进一步加强猪的身体机能。

技术领域

本发明涉及兽用蛋白疫苗技术领域，具体涉及一种融合蛋白疫苗组合物及其制备方法。

背景技术

随着畜牧业的发展和人民生活水平的不断提高，人们对畜产品的质量与安全问题日益重视，尤其猪肉产品是我国的主要肉食品之一，猪肉产品的质量与安全更是关注的热点。因此，把握好生猪的健康无疾病，提供安全优质的猪肉产品是保障人们的饮食安全和身体健康的关键。

猪常常会受到各种病毒的侵扰产生各种疾病，若感染后再医治可能会导致猪的身体健康受到影响，所以需要在其生病之前进行疫苗注射，保证其不受疾病的侵害，但现有疫苗注射方式基本上多个疫苗分开注射导致注射次数过多，耗时耗力，效率低下。

发明内容

本发明的目的在于提供一种融合蛋白疫苗组合物及其制备方法，用于解决背景技术中的问题。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种融合蛋白疫苗组合物，由抗原蛋白混合物和佐剂按用量比200-300μg：1g组成。

进一步地，所述抗原蛋白混合物为SaoA蛋白、猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪轮状病毒抗原、副猪嗜血杆菌抗原、猪细小病毒抗原、猪流感病毒抗原、猪伪狂犬病病毒抗原、猪霍乱病原抗原、大肠杆菌抗原、大叶性肺炎放线杆菌抗原按等质量比混合而成。

进一步地，所述佐剂包括如下重量份原料：白矿油2-10份、乳化剂1-8份、稳定剂1.5-3份、络合剂1.2-3.2份、增效剂1.1-3.3份、去离子水50-100份；

该佐剂由如下步骤制成：

步骤A1：将增效剂、稳定剂、络合剂加入去离子水分散，制得A相；将白矿油、乳化剂混合制得B相；

步骤A2：将A相与B相混合，持续搅拌40-60min，然后进行高速剪切与高压均质，使用微孔滤膜除菌后制得佐剂。

进一步地，所述乳化剂为质量比为1:1的甘露糖油酸酯与吐温80混合而得。

进一步地，所述稳定剂为可溶性二价无机盐，其中阳离子为钙离子或锌离子，阴离子为磷酸氢根离子或磷酸二氢根离子。

进一步地，所述络合剂为乙二胺四乙酸。

进一步地，所述增效剂由如下步骤制成：

步骤S1：按用量比1g：50mL将壳聚糖置于质量分数为1％的醋酸溶液中，搅拌分散后按5U/g的比例加入壳聚糖酶，在50℃水浴下，搅拌酶解5-6h，然后沸水浴10min灭酶，8000r/min离心5min，取上清液冻干制得酶解壳聚糖粉末；

步骤S2：将无水氯化锌加入烧瓶，然后加入冰醋酸，加热至98℃，然后加入间苯二酚，回流反应1-2h，降温至室温，然后加入冰水中，边搅拌边缓慢加入质量分数为36％的盐酸溶液，冰浴至10℃以下，抽滤后使用冷的6mol/L的盐酸洗涤，再使用去离子水洗涤，干燥后制得中间物1；所述无水氯化锌、冰醋酸、间苯二酚的用量比为15g：16mL：11g；

反应过程如下所示：