[发明专利]间充质干细胞及包含其的组合物用于制备治疗烧伤难愈创面的药物的用途

权利要求书

1.间充质干细胞用于制备治疗烧伤难愈创面的药物的用途。

2.一种组合物，其包含间充质干细胞1×10⁶～10×10⁶个/ml，氯化钠0.8-1.0％(w/v)和注射用水。

3.根据权利要求2所述的组合物，其剂型为注射剂。

4.一种凝胶剂，其包含间充质干细胞。

5.根据权利要求1所述的用途或权利要求2或3所述的组合物或权利要求4所述的凝胶剂，其中，所述间充质干细胞选自胚胎间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的用途或权利要求2或3所述的组合物或权利要求4所述的凝胶剂，其中所述间充质干细胞为第三代至第五代的间充质干细胞。

7.根据权利要求2或3所述的组合物或权利要求4所述的凝胶剂用于制备治疗烧伤难愈创面的药物的用途。

8.包含胎盘间充质干细胞的组合物用于制备治疗烧伤难愈创面的药物的用途，其中，所述药物为注射剂，所述组合物由1×10⁶～10×10⁶个/ml胎盘间充质干细胞分散于生理盐水中制成。

9.根据权利要求8所述的用途，其中，所述胎盘间充质干细胞为第三代至第五代的胎盘间充质干细胞。

10.根据权利要求8所述的用途，其中，所述胎盘间充质干细胞通过促进皮肤角质细胞、成纤维细胞的迁移和/或增殖治疗烧伤难愈创面。

11.根据权利要求8-10中任一项所述的用途，其中，所述胎盘间充质干细胞通过以下方法制备：

1)在生物安全柜中，将健康的胎盘组织用预冷的包含双抗和庆大霉素的PBS缓冲液冲洗三遍以上，洗去红细胞；在冰上，剪取胎盘基底膜及绒毛膜0.5-1.0cm厚的组织；

2)将羊膜揭去，剪取0.4-0.6cm厚度肉片，放入盛放含双抗的PBS缓冲液的培养皿中；

3)将所述肉片分别剪成1-3mm²的肉块，在剪的同时，将血管剔除；

4)用PBS缓冲液将组织内的血水洗净；将清洗干净的组织收集到离心管中，加入I型胶原酶消化液，37℃下，摇床震荡1-3h，用PBS缓冲液中止反应；

5)混匀后，500g-550g离心4-6min，收集上清；沉淀加PBS缓冲液定容至20-40ml，涡旋震荡25-35s，重悬细胞；

6)重复步骤(5)直至上清液无色，合并所收集的上清液，500g-550g离心4-6min，合并沉淀，用无血清细胞培养基重悬沉淀，用100目细胞筛过筛，补足无血清细胞培养基培养过夜；

7)根据细胞生长情况进行换液或补液处理，5-7天后观察到细胞爬出，即为一代PMSCs；

8)当细胞融合度大于80％，进行常规传代操作，获得第二代至第五代PMSCs。

12.根据权利要求11所述的用途，其中，所述无血清细胞培养基包括3-4vol％UltroserG和0.8-1vol％GlutaMAX。