[发明专利]一种用于cas12a编辑DNA的缓冲液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于cas12a编辑DNA的缓冲液，其特征在于，所述缓冲液包括如下原料：

5-25mM的HEPES，pH6.8-7.7，80-300mM的KCl，5-20mM的MgCl₂，0.5％-2％的甘油以及0.3-0.7mM的DTT。

2.根据权利要求1所述的用于cas12a编辑DNA的缓冲液，其特征在于，所述缓冲液包括如下原料：

15-25nM的HEPES，pH6.8-7.7，120-200nM的KCl，10-15nM的MgCl₂，0.8-1.1％的甘油以及0.4-0.6mM的DTT。

3.权利要求1-2任一项所述的用于cas12a编辑DNA的缓冲液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

配制所需浓度的HEPES溶液，调节pH，然后按照所需浓度，依次加入KCl、MgCl₂、甘油和DTT，混合均匀，即得。

4.根据权利要求3所述的用于cas12a编辑DNA的缓冲液的制备方法，其特征在于，所述调节pH至6.8-7.7。

5.权利要求1-2任一项所述的缓冲液在cas12a编辑乙流DNA中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

1)将所述缓冲液与cas12a、crRNA、乙流DNA、DNA reporter及RNA酶抑制剂混合后，反应；

2)取混合后的反应液，加入纯水混合，试纸条检测。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤1)中，所述反应的条件为35-40℃反应25-35min。