[发明专利]一种人参皂苷F1的制备方法

说明书

本发明公开了一种人参皂苷F₁的制备方法，该方法是将基因PnDDS、P12H、D6H和UGTPn20同时转入烟草中获得能够合成人参皂苷F₁的转基因烟草，其中基因PnDDS的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，基因P12H的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，基因D6H的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，基因UGTPn20的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；实验结果显示本发明获得的转基因烟草植株能够合成人参皂苷F₁，使得人参皂苷F₁的获取更加高效便捷，且本发明方法简单，易操作，适于规模化生产和市场推广应用，本发明为获取人参皂苷F₁提供了新途径。

技术领域

本发明属于生物医药制备技术领域，特别是一种在烟草中异源合成人参皂苷F₁的方法。

背景技术

人参属植物一直以来都被用于治疗各种疾病和改善身体机能，其中三萜皂苷是人参属植物的主要活性成分。三萜皂苷具有促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、抑制氧化应激、抗炎、增加细胞活力等多种药理作用，可对神经细胞、心肌细胞、肝细胞、肺上皮细胞等多种细胞发挥保护作用。

人参皂苷F₁( ginsenoside F₁ )为人参、三七、西洋参等药用植物中的稀有达玛烷型三萜皂苷成分，由PPT和糖基供体UDP-葡萄糖（UDP-glucose）经过UDP-葡萄糖基转移酶的催化作用生成的一种原人参三醇型皂苷，具有抗肿瘤、抗衰老、抗氧化等功效。人参皂苷F₁对皮肤癌细胞B16的增殖和迁移以及黑色素的产生有很强的抑制作用，还可以保护由紫外线引起的对人体角质层HaCaT的损害。尽管人参皂苷F₁具有重要的药理活性，但其在人参属药材中含量非常低，加之人参属物种为多年生植物，生长周期长，使得人参皂苷F₁不易获得，价格昂贵，迫切需要开发获取人参皂苷F₁的新方法和新途径。

烟草作为一种种植广泛，栽培技术成熟的经济作物，体内具有丰富的天然产物合成系统，并且烟草具备成熟的转基因技术体系。尽管烟草可能具备合成天然化合物的潜力，但尚未见到在烟草中合成人参皂苷F₁的报道，且烟草基因组中没有发现合成包括人参皂苷F₁在内的达玛烷型四环三萜皂苷的完整通路，说明烟草本身不具备合成此类皂苷的能力。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种人参皂苷F₁的制备方法，该方法通过在烟草中构建合成人参皂苷F₁的途径，从而在烟草中产生人参皂苷F₁，本发明提供一种获得人参皂苷F₁的新途径；

本发明方法是将基因PnDDS、P12H、D6H和UGTPn20同时转入烟草中获得能合成人参皂苷F₁的转基因烟草，其中所述基因PnDDS的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，基因P12H的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，基因D6H的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，基因UGTPn20的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

本发明目的通过以下技术方案实现：