本发明公开了一种在三七细胞中合成竹节参皂苷的方法，该方法是通过构建PnDS基因RNAi表达载体，并将其导入三七细胞中获得合成竹节参皂苷的三七细胞，其中RNAi片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；该方法从反向调控的角度出发，抑制三七皂苷生物合成途径中涉及达玛烷型三萜皂苷合成支路的第一个关键酶基因PnDS的表达，减少达玛烷型三萜皂苷的合成，从而促使三七细胞合成原本不含有的齐墩果烷型皂苷‑‑竹节参皂苷，本发明为三七细胞工业化大规模生产竹节参皂苷Ⅳa、竹节参皂苷Ⅳ提供了新途径。
本发明公开了一种竹节参皂苷Ⅳa的制备方法，该方法是将外源基因UGTPj8转入烟草中，获得合成竹节参皂苷Ⅳa的转基因烟草，其中基因UGTPj8的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；本发明方法获得的转基因烟草能够合成竹节参皂苷Ⅳa，具备规模化生产竹节参皂苷Ⅳa的潜力，为获取竹节参皂苷Ⅳa提供了新途径。
本发明公开了一种三七富含脯氨酸蛋白基因PnPRPL1及应用，PnPRPL1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，编码富含脯氨酸蛋白，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实PnPRPL1基因具有提高植物抗真菌侵染的功能，将本发明抗真菌PnPRPL1基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，PnPRPL1转基因烟草对弯孢霉的抗性明显提高。
本发明公开了一种三七诱导型启动子PPRP，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实三七启动子PPRP对几种植物激素、生物胁迫和非生物胁迫的响应，将本发明三七诱导型启动子PPRP与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在乙烯利、茉莉酸甲酯、尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、氯化钠、氯化铝、受伤处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强；由此可见三七启动子PPRP受几种激素、生物和非生物胁迫因子的诱导，能用于植物抗逆境基因工程。
本发明公开了一种诱导型启动子PCHI，其来源于岷江百合，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实岷江百合启动子PCHI响应茉莉酸甲酯和生物胁迫；将本发明岷江百合启动子PCHI与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在茉莉酸甲酯、尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌和稻黑孢霉处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强；岷江百合启动子PCHI受茉莉酸甲酯和生物胁迫因子的诱导，能用于植物抗病基因工程中。
本发明公开了一种三七诱导型启动子R1及其应用，R1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实三七启动子R1响应几种植物激素、生物和非生物胁迫；将本发明三七启动子R1与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的融合表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、链格孢、NaCl、AlCl3、赤霉素、茉莉酸甲酯、水杨酸、脱落酸、乙烯利处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强；三七启动子R1受几种植物激素、生物和非生物胁迫因子的诱导，能用于植物抗病基因工程。
本发明公开了一种岷江百合诱导型启动子PD1及其应用，其中诱导型启动子PD1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实岷江百合启动子PD1响应几种植物激素、生物和非生物胁迫；将本发明岷江百合启动子PD1与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的融合基因表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在脱落酸、水杨酸、茉莉酸甲酯、赤霉素、乙烯利、茄腐镰刀菌、伤胁迫和氯化钠处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强；本发明诱导型启动子PD1在抗生物或非生物胁迫的基因工程中具有广阔的应用前景。
本发明公开了一种三七诱导型启动子PPO1及其应用，PPO1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实三七启动子PPO1响应几种植物激素、生物胁迫和非生物胁迫。将本发明三七诱导型启动子PPO1与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在赤霉素、吲哚乙酸、脱落酸、受伤、茄腐镰刀菌、链格孢处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强。由此可见三七启动子PPO1受几种激素、生物和非生物胁迫因子的诱导，能用于植物抗逆境基因工程。
本发明公开了一种三七诱导型启动子PPL1及其应用，PPL1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实三七启动子PPL1对几种植物激素、生物胁迫和非生物胁迫的响应，将本发明三七诱导型启动子PPL1与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在赤霉素、水杨酸、乙烯利、氯化铝、尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强；由此可见三七启动子PPL1受几种激素、生物和非生物胁迫因子的诱导，能用于植物抗逆境基因工程。
本发明公开了一种岷江百合诱导型启动子PG1，岷江百合诱导型启动子PG1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实岷江百合启动子PG1响应几种植物激素、生物和非生物胁迫；将本发明岷江百合启动子PG1与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的融合表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在脱落酸、水杨酸、尖孢镰刀菌、稻黑孢霉、致密链格孢、伤害胁迫处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强，岷江百合启动子PG1受几种植物激素、生物和非生物胁迫因子的诱导，在抗生物或非生物胁迫的基因工程中具有广阔的应用前景。
本发明公开了一种岷江百合诱导型启动子PR4及其应用，PR4的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过分子生物学和基因工程相关技术研究证实岷江百合启动子PR4响应几种植物激素和生物胁迫；将本发明岷江百合启动子PR4与β‑葡萄糖苷酸酶基因构建的融合表达框转入烟草中表达，通过荧光法定量检测转基因烟草的葡萄糖苷酸酶活性，结果表明转基因烟草在茉莉酸甲酯、水杨酸、尖孢镰刀菌、链格孢、厚垣镰刀菌处理后葡萄糖苷酸酶活性明显增强；可见岷江百合启动子PR4是一种受植物激素和生物胁迫因子的诱导的启动子，能用于植物抗病基因工程。
本发明公开了一种三七WRKY转录因子基因PnWRKY12的新用途，即其在提高烟草对棕黑腐质霉（Humicola fuscoatra）抗性中的应用，三七WRKY转录因子基因PnWRKY12的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所述，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实PnWRKY12基因具有提高植物抗真菌的功能，将本发明抗真菌的PnWRKY12基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草植株具有很强的抗真菌侵染能力，实验结果显示超表达PnWRKY12的转基因烟草对棕黑腐质霉的侵染具有高水平的抗性。
本发明公开了一种岷江百合Dirigent类似蛋白基因LrDIR1，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述，编码如SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的蛋白质，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实LrDIR1基因具有提高植物抗真菌的功能，将本发明抗真菌的LrDIR1基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草植株具有很强的抗真菌侵染能力，实验结果显示过表达LrDIR1的转基因烟草对尖孢镰刀菌、草茎点霉的侵染具有抗性。
