[发明专利]一种发热液及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种发热液及其制备方法和应用，属于核酸等温扩增反应领域。本发明提供了一种发热液的制备方法，包括以下步骤：向液态四水合硝酸钙中加入固态四水合硝酸钙，得到所述发热液。本发明提供的发热液能够提供恒定40℃的温度，用来进行核酸等温扩增反应，便携性好且不需要电能，能够降低成本。液态四水合硝酸钙是一种过冷液体，凝固点为40℃，以不稳定的介稳状态存在，加入晶体种子固态四水合硝酸钙后会突然结晶，同时放出凝固热，而使温度上升到凝固点，且释放凝固热的过程持久且温度恒定。且本发明提供的发热液能够在3分钟内达到40℃的工作温度，提高了检测效率。

技术领域

本发明涉及核酸等温扩增反应技术领域，尤其涉及一种发热液及其制备方法和应用。

背景技术

近年来，随着分子生物学技术的迅速发展，基于核酸检测的诊断方法已大量建立并且广泛用在研究、诊断学、法医学、医学、食物科学和农业中。等温扩增技术与其它的核酸扩增技术相比，具有快速、高效、特异的优点且无需专用昂贵的设备。因此，在基于核酸的检测方法的情况下，与已建立的但较慢的基于PCR的方法相比，快速等温扩增技术最近已变得越来越重要。PCR需要热循环，以便将双链核酸例如DNA的两条链分离开。相反，等温扩增方法不需要热循环仪。等温扩增在实验室的条件下，通常使用水浴锅或者是专用的电子恒温加热装置提供恒定的反应温度。但是在非实验室的条件下，如“现场即时测试(Point ofCare Testing)”(POCT)则还是必需要携带提供恒定反应温度的电子控温设备。POCT是指在患者医疗点处或附近进行的诊断性测试，即去集中化的检查，例如可以在私人医疗机构、小医院、药店中或者甚至在事故或其它医疗紧急事件的现场或位点处或者在救护车内执行所述检查。现场即时诊断需要快速且简单的测试。若所处的区域条件恶劣，无法提供稳定电流，那么检测工作将被迫停止。且现有恒温加热成本较高，携带起来也较为不便。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种发热液及其制备方法和应用。本发明制得的发热液能够提供40℃的温度，且成本低，携带方便。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种发热液的制备方法，包括以下步骤：

向液态四水合硝酸钙中加入固态四水合硝酸钙，得到所述发热液。

优选地，所述液态四水合硝酸钙与固态四水合硝酸钙的用量比为80mL：1g。

优选地，所述液态四水合硝酸钙由包括以下步骤的方法制得：

将四水合硝酸钙在70℃水浴中融化，得到液体；

将所述液体使用0.22μm的油系滤膜过滤，过滤后通过密闭的管路直接保存于洁净密闭的容器中，得到过滤清液，所述过滤清液在使用前不接触外界空气；

将所述过滤清液冷却，得到所述液态四水合硝酸钙。

优选地，所述冷却为自然冷却至室温。

优选地，所述过滤的过程中液体应的温度为60℃。

本发明还提供了上述技术方案所述制备方法制得的发热液，所述发热液提供40℃的温度。

本发明还提供了上述技术方案所述的发热液在核酸等温扩增反应中的应用。

优选地，所述应用中，所述发热液使用完毕后，还包括将所得固态发热液循环使用，所述循环使用包括以下步骤：

将所述固态发热液依次进行融化和过0.22μm的油系滤膜，得到过滤液；

将所述过滤液冷却后加入固态四水合硝酸钙。

本发明提供了一种发热液的制备方法，包括以下步骤：向液态四水合硝酸钙中加入固态四水合硝酸钙，得到所述发热液。